Resumo da IX Jornada Científica de Pós-Graduação e XIII Reunião ...
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Avaliação do potencial para reciclagem agrícola dos biossólidos (lodos) provenientes de reatores (UASB seguido de filtro triplo anaeróbio) que tratam efluente hospitalar.
Bolsista: Walace Rodrigues da Silva Nome em cit. bibliográficas: SILVA, Walace R. Orientador(a): Dalton Marcondes Silva Nome em cit. bibliográficas: SILVA, Dalton M. Coorientador(a): Wilma de Carvalho Pereira Nome em cit. bibliográficas: PEREIRA, Wilma C. E-mail: ecalaw@bol.com.br Unidade: ENSP Departamento: DSSA Lab. / Núcleo: MACROPOLUENTES Evento: XIII Reunião Anual de Iniciação Científica
Resumo:
Os biossólidos são ricos em macronutrientes cálcio e fosforo e nos micronutrientes zinco e cobre,Essa característica é particularmente importante nos solos fixadores de fóforo,pois sua natureza organica protege o fosfato da oxidação,aumentando sua disponibilidade, reduzindo os custos com fertilizantes e corretivos, uma vezque torna os elementos já existentes mais acessíveis,diminuindo a acidez do solo.Os solos da região de Paracambi são classificados como argissolos (vermelho e amarelo)são ácidos .
Serão realizadas a coleta do material seguindo as normas de amostragem de solos da ABNT.NBR B6457/86 e para os biossólidos as amostras devem ser representativas,serão estudadas as característicasdos biossólidos com relação aos teores de matéria orgânica,concentrações de metais, pH e etc.
Metas operacionais:
1:realizar coleta do material-os lodos digeridos e secos produzidos na ETEem estudo;
2:Realizaçõa de análises laboratoriais do solo;
3:Montagem do experimento;
4:Montagem de um banco de dados e interpretação dos resultados;
5:Elaboração do relatório final;
Publicado ou submetido? não Situação: Em execução
Palavras-chave: 1: SOLOS 2: BIOSSÓLIDOS 3: REATOR UASB Título do projeto do orientador: Avaliação do potencial para reciclagem agrícola dos biossólidos (lodos) provenientes de reatores (UASB seguido de filtro triplo anaeróbio) que tratam efluente hospitalar.
Programa/projeto: CNPq - FIOCRUZ/PIBIC Apoio financeiro: Não Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Agrárias 5.00.00.00-4 Área: Agronomia 5.01.00.00-9 Sub-Área: Ciência do Solo 5.01.01.00-5 Especialidade: Manejo e Conservação do Solo 5.01.01.06-4 Detecção de Organismos Geneticamente Modificados (OGM) em Alimentos Aluno: Renata Trotta Barroso Ferreira Nome em cit. bibliográficas: FERREIRA, Renata T. B. Vínculo Institucional: Servidora Tipo de Bolsa: Sem Bolsa E-mail: rtrotta@incqs.fiocruz.br Curso: Mestrado em Vigilância Sanitária Ano de Ingresso: 2005 Orientador(a): Paola Cardarelli Nome em cit. bibliográficas: CARDARELLI, Paola Segundo(a) orientador(a): Nome em cit. bibliográficas: Pesquisador(a) Colaborador(a): Nome em citações bibliográficas: Área de Concentração: Ciência e Tecnologia de Alimentos Evento: IX Jornada Científica da Pós-Graduação
Resumo:
As plantas transgênicas já fazem parte do nosso dia a dia e estão sendo comercializadas ou em fase de teste no mundo inteiro. Novos eventos de transformação estão ocorrendo em diversos laboratórios do mundo e os alimentos contendo organismos geneticamente modificados (OGM) já ocupam prateleiras em muitos supermercados. A soja tem sido amplamente consumida enquanto ingrediente em produtos processados como embutidos, biscoitos, sucos, produtos cárneos, sopas, leites, farinhas, etc.
O Brasil regulamentou o plantio e a comercialização da soja geneticamente modificada, estabeleceu o limite de 1% para a informação no rótulo de produtos alimentícios que contenham ou sejam constituídos por OGM e criou o símbolo que deve constar na embalagem para produtos que encontram-se nesta situação.
A adequação dos produtos alimentícios à legislação brasileira sobre os limites de OGM para rotulagem é baseada na sua detecção, identificação e quantificação.
Métodos baseados na PCR podem ser utilizados tanto em análises qualitativas como em quantitativas. A PCR em Tempo Real é utilizada na etapa de quantificação e baseia-se na atividade da exonuclease 5-3 da Taq DNA polimerase e na degradação específica de sondas (Princípio Taq Man).
Através da análise de 158 amostras, constatou-se a presença de soja RR, utilizando a técnica da Nested PCR, em 48 amostras (30,3 %): 7 soja em grãos, 13 bebidas e pós para bebidas, 3 rações, 3 proteínas de soja, 6 sopas desidratadas, 6 produtos cárneos, 1 massa, 2 pós para preparo de alimentos, 4 plantas, 7 farinhas de trigo . A quantificação será realizada nestas amostras para verificação do cumprimento da legislação de rotulagem.
Palavras-chave: 1: OGM 2: soja RR 3: PCR Apoio financeiro: 1: Fiocruz 2: Outros 3: ANVISA
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Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Agrárias 5.00.00.00-4 Área: Ciência e Tecnologia de Alimentos 5.07.00.00-6 Sub-Área: Ciência de Alimentos 5.07.01.00-2 Especialidade: Avaliação e Controle de Qualidade de Alimentos 5.07.01.06-1 Comparação da analgesia pós-operatória da morfina, cetoprofeno e morfina + cetoprofeno administrados antes ou após a ovariossalpingo-histerectomia em cães Aluno: Fabio Otero Ascoli Nome em cit. bibliográficas: ASCOLI, Fabio O. Vínculo Institucional: Tipo de Bolsa: FIOCRUZ E-mail: fabioascoli@terra.com.br Curso: Doutorado em Biologia Celular e Molecular Ano de Ingresso: 2004 Orientador(a): Hugo Caire de Castro Faria Neto Nome em cit. bibliográficas: CASTRO-FARIA-NETO, Hugo C. Segundo(a) orientador(a): Nome em cit. bibliográficas: Pesquisador(a) Colaborador(a): João Henrique Neves Soares Nome em citações bibliográficas: SOARES, João H. N. Área de Concentração: Imunofarmacologia Evento: IX Jornada Científica da Pós-Graduação
Resumo:
Nas últimas décadas, os médicos veterinários e seus clientes passaram a preocupar-se com a dor e seus efeitos adversos que interferem na qualidade de vida dos animais, modificando a abordagem na avaliação da dor ( Hellyer, 1999 a). Segundo Gaynor (1999), a dor possui um papel de extrema importância na preservação da vida, porém respostas excerbadas podem causar morbidade e mortalidade.O objetivo deste estudo é comparar a analgesia pós-operatória em grupos de cães tratados com cetoprofeno, morfina e morfina + cetoprofeno antes ou após a ovariossalpingo-histerectomia e avaliar a relação entre a produção de mediadores inflamatórios e a dor pós-operatória. Serão utilizadas 60 cadelas de raças diferentes, hígidas, com peso compreendido entre 6 e 30 Kg e idade entre 1 e 5 anos. Em todos cães, a medicação pré-anestésica será realizada com acepromazina (0,02 mg.kg-1), a indução com tiopental (10 mg.kg-1) e a manutenção com halotano na concentração de 1,3%. Os animais serão divididos em seis grupos: Grupo I (cetoprofeno 2 mg.kg-1no pré-operatória), Grupo II (cetoprofeno 2 mg.kg-1no trans-operatória), Grupo III (morfina 0,5 mg.kg-1no pré-operatória), Grupo IV (morfina 0,5 mg.kg-1no trans-operatória), Grupo V (cetoprofeno 2 mg.kg-1+ morfina 0,5 mg.kg-1no pré-operatória) e Grupo VI (cetoprofeno 2 mg.kg-1+ morfina 0,5 mg.kg-1no trans-operatória). A dor pós-operatória será avaliada durante 48 horas (1, 2, 3, 4, 6, 8, 10, 12, 24, 36 e 48 horas) utilizando a escala analógica visual e a escala da Universidade de Melbourne. Todas as avaliações serão filmadas para posterior análise por outros dois avaliadores. Tabém será coletada amostras de plasma nos períodos pré-operatório, 6, 12, 24 e 48 horas após a cirurgia para análise de óxido nítrico, prostaglandina E e cortisol.
Palavras-chave: 1: Analgesia 2: Mediadores inflamatórios 3: Cães Apoio financeiro: 1: Fiocruz 2: 3: UFF
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Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Agrárias 5.00.00.00-4 Área: Medicina Veterinária 5.05.00.00-7 Sub-Área: Clínica e Cirurgia Animal 5.05.01.00-3 Especialidade: Anestesiologia Animal 5.05.01.01-1 Avaliação da ocorrência de leishmaniose tegumentar americana em cães e gatos domésticos, correlacionados aos casos humanos residentes em área endêmica na região do Mendanha, Município do Rio de Janeiro. Aluno: Fabiano Borges Figueiredo Nome em cit. bibliográficas: FIGUEIREDO, Fabiano B. Vínculo Institucional: Mestrando Tipo de Bolsa: CAPES E-mail: fabiano@ipec.fiocruz.br Curso: Mestrado em Pesquisa Clínica em Doenças Infecciosas Ano de Ingresso: 2004 Orientador(a): Tânia Maria Pacheco Schubach Nome em cit. bibliográficas: SCHUBACH, Tânia M. P. Segundo(a) orientador(a): Armando de Oliveira Schubach Nome em cit. bibliográficas: SCHUBACH, Armando O. Pesquisador(a) Colaborador(a): Maria de Fátima Madeira Nome em citações bibliográficas: MADEIRA, Maria F. Área de Concentração: Doenças Infecciosas Evento: IX Jornada Científica da Pós-Graduação
Resumo:
INTRODUÇÃO: No Estado do Rio de Janeiro, a leishmaniose tegumentar americana (LTA) causada por Leishmania (Viannia) braziliensis é endêmica. O padrão epidemiológico predominante de transmissão ocorre no intra e no peridomicílio, condicionada à adaptação de algumas espécies de flebotomíneos, em especial da Lutzomyia intermedia, ao meio ambiente modificado da periferia da cidade, acometendo seres humanos, cães e eqüinos. Embora animais domésticos sejam encontrados infectados por L. (V.) braziliensis em regiões com ocorrência de casos humanos, pouco se conhece sobre sua susceptibilidade à infecção e sobre os aspectos clínicos da doença nesses animais. OBJETIVO: Verificar a ocorrência de LTA em cães e gatos domésticos naturalmente infectados. METODOLOGIA: Foi realizada busca ativa de cães e gatos domésticos domiciliados e semidomiciliados em moradias de casos índices humanos de LTA, atendidos no Centro de Referência em Leishmanioses-IPEC entre 2002 e 2004, e seus vizinhos, residentes em região endêmica do município do Rio de Janeiro. Os animais foram submetidos a exame clínico e biópsias de lesão cutânea, para cultura, exame direto e histopatológico. RESULTADOS: Foram visitados 62 domicílios: 22 com casos humanos índices e 40 domicílios vizinhos, habitados por 248 pessoas, destas 34 com LTA atual ou passada. Foram examinados 52 cães sendo que 55,7% machos e 44,2% fêmeas. Lesões cutâneas sugestivas de LTA foram observadas em 51,9% dos cães e desses o diagnóstico parasitológico foi confirmado em 14 cães (51,9%). Foram examinados 42 gatos, sendo 52,4% machos e 47,6% fêmeas, dos quais cinco (11,9%) apresentavam lesões cutâneas. De três (7,1%) desses isolou-se L. (V.) braziliensis. No exame histopatológico pode-se visualizar formas amastigotas nos três felinos. CONCLUSÃO: Na área estudada, encontrou-se um elevado percentual de cães e gatos infectados. Palavras-chave: 1: leishmaniose tegumentar americana 2: cães 3: gatos Apoio financeiro: 1: Fiocruz 2: Fiocruz 3:
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Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Agrárias 5.00.00.00-4 Área: Medicina Veterinária 5.05.00.00-7 Sub-Área: Medicina Veterinária Preventiva 5.05.02.00-0 Especialidade: Doenças Infecciosas de Animais 5.05.02.03-4 Estudo comparativo da virulência entre isolados de Sporothrix schenckii provenientes de gatos com esporotricose naturalmente adquirida. Aluno: Luiz Rodrigo Paes Leme Nome em cit. bibliográficas: PAES-LEME, Luiz R. Vínculo Institucional: Bolsista Tipo de Bolsa: CAPES E-mail: luizleme@ipec.fiocruz.br Curso: Mestrado em Pesquisa Clínica em Doenças Infecciosas Ano de Ingresso: 2005 Orientador(a): Tânia Maria Pacheco Schubach Nome em cit. bibliográficas: SCHUBACH, Tânia M. P. Segundo(a) orientador(a): Cintia de Moraes Borba Nome em cit. bibliográficas: BORBA, Cintia M. Pesquisador(a) Colaborador(a): Nome em citações bibliográficas: Área de Concentração: Doenças infecciosas Evento: IX Jornada Científica da Pós-Graduação
Resumo:
A Esporotricose é causada pelo fungo dimórfico Sporothrix schenckii. A infecção costuma ocorrer pela inoculação traumática de materiais contaminados, acometendo principalmente pessoas em contato com o solo e vegetais. Em 1952, Singer & Muncie sugeriram a possível transmissão da esporotricose felina ao homem e, atualmente, consideram-se proprietários, médicos veterinários e tratadores uma nova categoria de risco ocupacional, a qual eventualmente se infectam através do contato, da mordedura ou da arranhadura de gatos doentes. A partir de 1998 uma epidemia de esporotricose vem sendo identificada no Rio de Janeiro, onde o gato possui papel fundamental na transmissão desta micose. Pouco é conhecido sobre a susceptibilidade e resistência ao S. schenckii, e a virulência do S. schenckii tem sido alvo de investigações, tais como: capacidade de crescimento a 37o C, proporção de carboidratos (rhamnose/mannose) da parede celular, enzimas extracelulares (fosfatase), proteinases (proteinase I e proteinase II), produção de melanina e lipídios da parede celular. Em relação aos mecanismos de defesa do hospedeiro, estudos têm sugerido que a imunidade mediada celular desempenha um importante papel na proteção do hospedeiro contra este fungo. No presente estudo, a virulência de isolados do Rio de Janeiro e do Rio Grande do Sul será comparada em modelo murino, estudando-se as características morfológicas dos isolados, os sinais clínicos observados na progressão da doença nos camundongos, a sobrevivência dos camundongos, os aspectos histopatológicos e a verificação da presença de S. schenckii em diferentes sítios anatômicos. Através do presente estudo pretende-se verificar se eventuais diferenças na virulência observada em camundongos, de isolados de Sporothrix schenckii originados do Rio de Janeiro e do Rio Grande do Sul, que poderiam sugerir que fatores relacionados ao fungo possam explicar parcialmente a diferença de comportamento epidemiológico nas duas regiões geográficas. Palavras-chave: 1: virulência 2: Sporothrix schenckii 3: gatos Apoio financeiro: 1: Fiocruz 2: CAPES 3:
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Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Agrárias 5.00.00.00-4 Área: Medicina Veterinária 5.05.00.00-7 Sub-Área: Medicina Veterinária Preventiva 5.05.02.00-0 Especialidade: Doenças Infecciosas de Animais 5.05.02.03-4 Padronização da técnica de imunoperoxidase no diagnóstico da leishmaniose tegumentar americana canina Aluno: Isabele Barbieri dos Santos Nome em cit. bibliográficas: BARBIERI-DOS-SANTOS, Isabele Vínculo Institucional: Bolsista Tipo de Bolsa: CAPES E-mail: isabele@ipec.fiocruz.br Curso: Mestrado em Pesquisa Clínica em Doenças Infecciosas Ano de Ingresso: 2005 Orientador(a): Tânia Maria Pacheco Schubach Nome em cit. bibliográficas: SCHUBACH, Tânia M. P. Segundo(a) orientador(a): Rogerio Tortelly Nome em cit. bibliográficas: TORTELLY, Rogerio Pesquisador(a) Colaborador(a): Leonardo Pereira Quintella Nome em citações bibliográficas: QUINTELLA, Leonardo P. Área de Concentração: Doenças Infecciosas Evento: IX Jornada Científica da Pós-Graduação
Resumo:
A leishmaniose tegumentar americana (LTA) causada pela Leishmania (Viannia) braziliensis é endêmica no Estado do Rio de Janeiro. Nos cães se caracteriza pela presença de lesões cutâneas ulceradas localizadas principalmente nas orelhas, bolsa escrotal, focinho e membros. Na rotina, a confirmação do diagnóstico da LTA canina é realizada através da demonstração do agente etiológico, por meio do exame citopatológico, histopatológico ou da cultura de tecido. Entretanto, mesmo quando associados, estes métodos podem não detectar o parasito, devido a escassez de formas nas lesões de pele e das limitações das técnicas habituais de diagnóstico. É possível que a pesquisa de antígenos parasitários in situ, por meio da técnica de imunoperoxidase em cortes histológicos, possa contribuir como um método alternativo de diagnóstico. O método imunohistoquímico é particularmente sensível, pois detecta a presença de formas amastigotas e permite a visualização de padrões celular e/ou vascular e/ou neural para lesões ativas. O objetivo deste estudo é padronizar a reação de imunohistoquímica, pela técnica da imunoperoxidase com soro policlonal de coelho anti-Leishmania sp, no diagnóstico da LTA canina; descrever as alterações histopatológicas das lesões cutâneas; comparar a sensibilidade e a especificidade da imunohistoquímica com as técnicas de diagnóstico usuais; investigar a ocorrência de possíveis reações cruzadas com a esporotricose; descrever padrões celular e/ou vascular e/ou neural para lesões ativas de Leishmania sp; e implantar a técnica na rotina do Laboratório de Anatomia Patológica do IPEC. Serão utilizados 110 fragmentos conservados em formol tamponado 10%, de lesões cutâneas ulceradas de cães procedentes do Estado do Rio de Janeiro, que serão agrupados em 3 grupos. No grupo 1, serão incluídos 40 fragmentos de cães com LTA; no grupo 2, 40 fragmentos de cães com esporotricose; e no grupo 3 (grupo controle), 30 fragmentos de cães com neoplasias. Estes fragmentos serão submetidos a exame histopatológico corados pela hematoxilina-eosina e outras colorações especiais, se necessárias e imunohistoquímico.
Palavras-chave: 1: Leishmaniose tegumentar americana 2: Cão 3: Imunohistoquímica Apoio financeiro: 1: Fiocruz 2: CAPES 3:
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Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Agrárias 5.00.00.00-4 Área: Medicina Veterinária 5.05.00.00-7 Sub-Área: Medicina Veterinária Preventiva 5.05.02.00-0 Especialidade: Doenças Parasitárias de Animais 5.05.02.04-2
Verificação da presença de formas amastigotas e de antígenos de Leishmania em cortes histológicos de cicatrizes cutâneas e de pele sadia de pacientes com leishmaniose tegumentar americana.
Bolsista: Luisa Helena Monteiro de Miranda Nome em cit. bibliográficas: MIRANDA, Luisa H. M. Orientador(a): Armando de Oliveira Schubach Nome em cit. bibliográficas: SCHUBACH, Armando O. Coorientador(a): Leonardo Pereira Quintella Nome em cit. bibliográficas: QUINTELLA, Leonardo P. E-mail: luisahmiranda@ig.com.br Unidade: IPEC Departamento: Doenças Infecciosas Lab. / Núcleo: Serviço de zoonoses Evento: XIII Reunião Anual de Iniciação Científica
Resumo:
INTRODUÇÃO: A leishmaniose tegumentar americana (LTA) se apresenta com úlceras cutâneas que, tratadas ou não, evoluem para cicatrização em meses ou até anos. Relatos de reativação sugerem a persistência do parasita. O diagnóstico depende da demonstração parasitológica e a técnica de imunoperoxidase é uma alternativa sensível. Em lesões ativas este método é capaz de detectar a presença das formas amastigotas e de marcar o citoplasma de células fagocitárias, endoteliais e neurais da derme. Em tecido cicatricial, foi descrita a marcação de células fagocitárias e endoteliais, mas não de formas amastigotas. OBJETIVO: Verificar, pela técnica de imunoperoxidase, a presença de formas amastigotas e de antígenos de Leishmania em lesões ativas, cicatrizes cutâneas e pele sadia de pacientes com LTA. MATERIAL E MÉTODOS: De fevereiro a junho de 2005, cortes histológicos de 20 lesões ativas suspeitas de LTA foram examinados em hematoxilina-eosina (HE). Novos cortes do mesmo material foram utilizados na padronização da reação de imunohistoquímica (IHQ). A IHQ foi realizada com inibição da peroxidase endógena por solução de metanol e peróxido de hidrogênio em água destilada, recuperação antigênica em panela de vapor com tampão citrato e bloqueio de ligações inespecíficas com solução de leite em pó com albumina bovina. Os cortes foram incubados em câmara úmida "overnight" a 4°C com soro imune de coelhos anti-Leishmania (Leishmania) chagasi, na diluição de 1:400. O complexo avidina-biotina foi empregado como sistema de detecção. A revelação foi realizada com diaminobenzidina. Como controle positivo, foram utilizados casos com numerosas amastigotas vistas na HE. RESULTADOS: Na coloração pela HE, 5 casos (25%) foram positivos. A IHQ foi positiva em 10 casos (50%), aí incluídos todos os 5 casos positivos na HE.CONCLUSÃO: A reação de IHQ foi mais sensível que a coloração pela HE na detecção de amastigotas nas lesões ativas estudadas, podendo eventualmente ser útil para este fim em lesões cicatrizadas e pele sadia. A avaliação da marcação em células mononucleares, endoteliais e neurais e o estudo de lesões cicatrizadas e pele sadia serão etapas subsecutivas do projeto.
Publicado ou submetido? não Situação: Em execução
Palavras-chave: 1: Leishmaniose tegumentar americana 2: Imunohistoquímica 3: Cicatriz Título do projeto do orientador: Avaliação da persistência do parasito em pacientes de leishmaniose tegumentar americana e correlações epidemiológicas.
Programa/projeto: CNPq - FIOCRUZ/PIBIC Apoio financeiro: Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Agrárias 5.00.00.00-4 Área: Medicina Veterinária 5.05.00.00-7 Sub-Área: Medicina Veterinária Preventiva 5.05.02.00-0 Especialidade: Doenças Parasitárias de Animais 5.05.02.04-2
Tripanossoma cruzi em Thrichomys apereoides e Thrychomys pachyurus: estudo anátomo-patológico da infecção experimental.
Bolsista: Natashia Moraes Barbosa Nome em cit. bibliográficas: BARBOSA, Natashia M. Orientador(a): Ana Maria Jansen-Franken Nome em cit. bibliográficas: JANSEN-FRANKEN, Ana M. Coorientador(a): Gisele Braziliano de Andrade Nome em cit. bibliográficas: ANDRADE, Gisele B. E-mail: natashia_mb@yahoo.com Unidade: IOC Departamento: Protozoologia Lab. / Núcleo: Biologia de Tripanossomatídeos Evento: XIII Reunião Anual de Iniciação Científica
Resumo:
T. cruzi é um parasita digenético que possui um complexo ciclo de transmissão. Pouco ainda se sabe sobre as particularidades da interação deste parasita com seus hospedeiros silvestres. Por isso, foram selecionados para o presente estudo roedores caviomorfos silvestres do gênero Thricmomys, cujos ancestrais foram um dos mais antigos hospedeiros de T. cruzi. Este gênero representa espécies abundantes, de alta distribuição geográfica e alta prevalência para infecção por T. cruzi. T. apereoides e T. pachyurus são espécies crípticas de regiões endêmica (Piauí) e não endêmica (Pantanal) da Doença de Chagas, respectivamente. O objetivo deste trabalho foi determinar e comparar o padrão histopatológico nas espécies crípticas T. apereoides e T. pachyurus, durante a fase sub-patente da infecção por diferentes cepas de T. cruzi. A infecção foi realizada com os isolados de T. cruzi: (i) Y - isolado humano (referência); (ii) R4 - isolado de T. apereoides (PI) naturalmente infectado; (iii) FRN38 - isolado de T. pachyurus (MS) naturalmente infectado. Os animais foram mortos na fase sub-patente (150 dias de infecção), exceto um que morreu na fase patente (17 dias). Diversos órgãos foram corados com Hematoxilina Eosina. Para avaliação mais detalhada das lesões no coração, órgão mais lesionado, foram utilizadas as seguintes colorações especiais: Giemsa de Lennert para caracterização celular; Tricrômico de Masson para evidenciação de tecido conjuntivo; e Picrosíruis para caracterização de fibras colágenas. Os resultados mostraram que T. apereoides foi mais resistente às cepas de T. cruzi que T. pachyurus; das cepas, R4 foi a cepa mais patogênica e FRN38, a menos patogênica. O coração foi o órgão mais lesionado. Thrichomys sp apresentou padrão de lesão semelhante ao homem e a outros mamíferos.Thrichomys sp apresentou como possível peculiaridade quanto à cinética da fibrose a presença expressiva de mastócitos no infiltrado inflamatório e tecido conjuntivo. As espécies crípticas apresentam sensibilidades distintas à infecção por T. cruzi, o que sugere que desempenham diferentes papéis, quanto hospedeiros, no ciclo de transmissão do T. cruzi.
Publicado ou submetido? não Situação: Em execução
Palavras-chave: 1: Tripanosoma cruzi 2: Patologia Animal 3: Animais silvestres Título do projeto do orientador: Tripanosoma cruzi em Thrichomys apereoides e Thrichomys pachyurus (Caviomorpha, Echimyidae): infecção experimental e natural em biomas distintos.
Programa/projeto: Edital IC - CNPq 05/2004 Apoio financeiro: Fiocruz e UFRRJ Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Agrárias 5.00.00.00-4 Área: Medicina Veterinária 5.05.00.00-7 Sub-Área: Patologia Animal 5.05.03.00-6 Especialidade: Anatomia Patologia Animal 5.05.03.02-2
Implantação do Banco de Embriões do Biotério do CPqGM e Transferência do Status Sanitário do Biotério de Convencional Controlado para SPF.
Bolsista: Cristina Aragão Silva Nome em cit. bibliográficas: ARAGÃO, Cristina S. Orientador(a): Ricardo Ribeiro dos Santos Nome em cit. bibliográficas: SANTOS, Ricardo R. Coorientador(a): Vitor Valério Maffili Nome em cit. bibliográficas: MAFFILI, Vitor V. E-mail: cristinaaragaosilva@yahoo.com.br Unidade: CPqGM Departamento: BIOTERIO Lab. / Núcleo: BIOTERIO Evento: XIII Reunião Anual de Iniciação Científica
Resumo:
Ojetivou-se comparar o desenvolvimento in vitro de embriões de camundongos wild type (wt) C57Bl/6 e linhagens transgênica em background C57Bl/6, após o cultivo. No presente foram utilizados embriões das linhagens C57Bl/6 wt (T1) e dos seguintes transgênicos: C57Bl/6 iNOStm1Plh (T2), C57Bl/6 Ifngr1tm1Agt (T3), C57Bl/6 GFP (T4), C57Bl/6 Gt(ROSA)26Sortm1Ts (T5), C57Bl/6 Tnfrsf1atm1Imx (T6), C57Bl/6 Cd28tm1Mak (T7), C57Bl/l Il10tm1Cgn (T8) e C57Bl/6 ²2mtm1Unc (T9). As fêmeas foram superovuladas com 5UI de eCG e 5UI de hCG. Logo após a aplicação da hCG, as fêmeas foram acasaladas com os machos na proporção de 1:1 e retiradas no dia seguinte. A coleta dos embriões se deu 38 horas após a aplicação da hCG. Os embriões foram obtidos por lavagem da tuba uterina com meio M2 e os embriões obtidos foram selecionados e classificados. Os embriões considerados como viáveis foram colocados em solução crioprotetora (1,5M de propilenoglicol em meio M2) por 15 minutos e congelados conforme preconizado por RENARD, J.P.; BALBINET, C.; J. Exp. Zoo., 230-443, 1984. O descongelamento foi realizado retirando-se a palheta do botijão e deixando-a exposta à temperatura ambiente por 40 segundos. Em seguida, o conteúdo da palheta foi expelido numa placa de petri de 35mm e deixado por 5 minutos. Após este período, os embriões foram transferidos para uma placa contendo meio M2 e posteriormente cultivados em meio M16 por 72 horas em estufa de CO2. Foi verificada a taxa de desenvolvimento até o estádio de blastocisto eclodido. A verificação da taxa de desenvolvimento até o estádio de blastocisto foi realizada por meio do confronto de dados em tabela de contingência e utilizado o teste do qui-quadrado em nível de 5% de probabilidade. As taxas de eclosão foram de: T1 = 41/66 (62,1%)a; T2 = 20/37 (54,4%)a,b; T3 = 20/47 (42,5%)b,c; T4 = 30/55 (54,6%)a,c,d,e; T5 = 25/44 (56,8%)a,c; T6 = 33/51 (64,7%)a; T7 = 18/38 (47,4%)b,d; T8 = 21/59 (35,6%)b,e,f e T9 = 8/42 (19,0%)f. De forma geral, embriões de linhagens transgênicas apresentaram menores taxas de desenvolvimento in vitro. Contudo, os fatores envolvidos nessa redução ainda carecem de esclarecimentos.
Publicado ou submetido? não Situação: Em execução
Palavras-chave: 1: camundongo 2: embrião 3: cultivo Título do projeto do orientador: Banco de Embriões de Camundongos Geneticamente Modificados
Programa/projeto: CNPq - FIOCRUZ/PIBIC Apoio financeiro: FINEP Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Agrárias 5.00.00.00-4 Área: Medicina Veterinária 5.05.00.00-7 Sub-Área: Reprodução Animal 5.05.04.00-2 Especialidade: Ginecologia e Andrologia Animal 5.05.04.01-0 Prostaglandina E2 promove a perda da adesão célula-célula em um modelo de adenocarcinoma de cólon humano. Aluno: Marcelo Neves Tanaka Nome em cit. bibliográficas: TANAKA, Marcelo N. Vínculo Institucional: Mestrando Tipo de Bolsa: CNPq E-mail: tanaka@ioc.fiocruz.br Curso: Mestrado em Biologia Celular e Molecular Ano de Ingresso: 2004 Orientador(a): José Andres Morgado Díaz Nome em cit. bibliográficas: MORGADO-DÍAZ, José A. Segundo(a) orientador(a): Maurílio José Soares Nome em cit. bibliográficas: SOARES, Maurilio J. Pesquisador(a) Colaborador(a): Bruno Lourenço Díaz Nome em citações bibliográficas: DÍAZ, Bruno L. Área de Concentração: Biologia Celular Evento: IX Jornada Científica da Pós-Graduação
Resumo:
Células epiteliais interagem entre si através do complexo juncional (CJ), formado pelas junções tight (JT) e pelas junções aderentes (JA) responsáveis por manter a integridade dos tecidos. Esses complexos não somente medeiam a adesão célula-célula, mas são também responsáveis pela transdução de sinais que controlam o crescimento e a diferenciação celular. Trabalhos têm mostrado que diferentes vias de sinalização são afetadas durante a transformação maligna do epitélio. No entanto, esses mecanismos ainda são pouco entendidos. Sabendo que em adenocarcinoma coloretal a enzima ciclooxigenase-2 (COX-2) é superexpressa exercendo uma importante função na promoção tumoral e que a prostaglandina E2 (PGE2), maior produto de ação desta enzima sobre o ácido aracdônico, podendo induzir crescimento, migração e invasividade, neste trabalho, nos investigamos os efeitos do tratamento da PGE2 no CJ de uma linhagem de células derivadas de adenocarcinoma de cólon humano, Caco-2. Essas células foram plaqueadas em filtros transwell até atingir confluência, logo tratadas com 0,1¼M e 1¼M de PGE2 por 30 e 60 minutos. O fluxo para-celular de íons foi analisado medindo a resistência elétrica transepitelial (TER). As amostras dos respectivos tratamentos foram também processadas para microscopia eletrônica de transmissão (MET). Nossos resultados mostraram que células tratadas por 1h com PGE2 (0,1¼M e 1¼M) apresentaram diminuição na TER aproximadamente em 49% das células tratadas com 0,1¼M e 61% com 1¼M de PGE2, entretanto a TER foi parcialmente recuperada quando substituida por meio normal depois de 24h. Quando a monocamada de células foi analisada por MET, foi possível observar largos espaços na região das JAs, em células tratadas por 1h em relação a células não tratadas, que apresentaram um CJ bem definido, no entanto as JTs aparentemente permaneceram preservadas. O presente estudo mostra que PGE2 causou alterações no CJ, levando a distúrbios na permeabilidade para-celular a íons e perda no contato célula-célula. Mais experimentos estão em andamento para identificar as vias de sinalização envolvidas nesse evento e determinar outras funções deste prostanóide em câncer de cólon.
Palavras-chave: 1: Prostaglandina E2 2: adesão célula-célula 3: Caco-2 Apoio financeiro: 1: CNPq 2: 3: INCA e FAF
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Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Biofísica 2.09.00.00-7 Sub-Área: Biofísica Celular 2.09.02.00-0 Especialidade: Laser de baixa potência e cicatrização de ferimentos contaminados com sílica. Aluno: Alena Ribeiro Alves Peixoto Medrado Nome em cit. bibliográficas: MEDRADO, Alena R. A. P. Vínculo Institucional: Doutoranda Tipo de Bolsa: Sem Bolsa E-mail: alena@cpqgm.fiocruz.br Curso: CPqGM - Doutorado em Patologia Ano de Ingresso: 2003 Orientador(a): Zilton Araújo Andrade Nome em cit. bibliográficas: ANDRADE, Zilton A. Segundo(a) orientador(a): Nome em cit. bibliográficas: Pesquisador(a) Colaborador(a): Nome em citações bibliográficas: Área de Concentração: Patologia Geral Evento: IX Jornada Científica da Pós-Graduação
Resumo:
Os raios laser têm efeitos biológicos sobre os tecidos vivos. A laserterapia pode modular a resposta tecidual durante a cicatrização de ferimentos, principalmente atenuando o edema e a dor. O raio laser de baixa potência pode promover um incremento na síntese de colágeno tanto quantitativa quanto qualitativamente, bem como na orientação espacial das fibras, acelerando o amadurecimento do tecido cicatricial. Para melhor estudar estes aspectos foi planejado o presente trabalho, que utilizou um modelo de ferimento padronizado na pele de rato, o qual foi contaminado com sílica, para que a formação do tecido fibroso fosse estimulada. Foi dada ênfase à ação do laser sobre o padrão organizacional das fibras colágenas. Oitenta e quatro ratos Wistar, em três grupos experimentais, foram anestesiados para a realização de um ferimento cutâneo padronizado com 8,0 mm de diâmetro. No grupo controle a sílica e o laser não foram usados; no segundo grupo, o ferimento foi contaminado com 0,2 ml de sílica a 1%, ao passo que no terceiro, em adição à sílica, foi realizado tratmento com laser de arseneto de gálio e alumínio (LASER VR- KC- 610; potência contínua de 9 mW; comprimento de onda de 670 nm), utilizando-se a dosimetria de 4 J/cm2.
A análise histológica foi feita após 72 horas, 7, 10, 15, 21 e 30 dias. Os tecidos foram analisados pelos seguintes métodos: Histopatologia: hematoxilina-eosina e picro-sírius para colágeno; Imuno-histoquímica: anticorpos anti-desmina e anti-actina alfa de músculo liso e Imunofluorescência: colágenos tipo I e III, fibronectina e laminina. Os resultados foram submetidos à análise estatística. Resultados preliminares: Após 72 horas os animais tratados com laser mostraram redução do edema e do infiltrado inflamatório. A sílica acentuou a produção de colágeno e induziu reação granulomatosa na derme. No grupo tratado com laser, as lesões granulomatosas apareceram mais cedo, no décimo dia, e as fibras colágenas apareceram mais organizadas, lineares e paralelas. Não foram observadas alterações significativas com relação à espessura destas fibras. Palavras-chave: 1: Laser 2: Cicatrização cutânea 3: Sílica Apoio financeiro: 1: PAPES 2: 3:
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Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Biologia Geral 2.01.00.00-0 Sub-Área: Especialidade:
Estudo protéico da saliva de Lutzomyia longipalpis (Lutz & Neiva, 1912) (Diptera: Phlebotominae), vetor da Leismaniose Visceral.
Bolsista: Aline Rodrigues Soares Nome em cit. bibliográficas: SOARES, Aline R. Orientador(a): Aldina Barral Nome em cit. bibliográficas: BARRAL, Aldina Coorientador(a): José Carlos Miranda Nome em cit. bibliográficas: MIRANDA, José C. E-mail: allinesoares@bol.com.br Unidade: CPqGM Departamento: Imunologia Lab. / Núcleo: Laboratório de Imunoparasitologia Evento: XIII Reunião Anual de Iniciação Científica
Resumo:
Os flebotomíneos são insetos que transmissores das leishmanioses, doenças parasitárias causadas por protozoários do gênero Leishmania. A manutenção de uma colônia de flebotomíneos é importante para o estudo da biologia desses insetos e da biologia da Leishmania. Além disso, a sua saliva desempenha papel fundamental na fisiologia durante a ingestão do sangue e é um elo importante na interação hospedeiro-vetor-parasito. Este trabalho teve como objetivo a colonização de flebotomíneos em laboratório e obtenção da glândula salivar das fêmeas para estudo do perfil protéico. Para a colonização de Lutzomyia longipalpis foram realizadas capturas mensais de flebótomos no distrito de Cavunge (Bahia), utilizando armadilhas do tipo CDC. Os flebotomíneos chegados do campo foram alimentados em hamsters. Após a hematofagia, as fêmeas foram mantidas em dieta de solução açucarada para realização da oviposição. Num período de quatro a quinze dias, os ovos eclodiram e emergiram as larvas de primeiro estágio. Essas larvas foram alimentadas de ração composta de 4% de terra vegetal, 4% de fezes de coelho e 10% de ração para peixe. Após os quatro estágios larvais, se transformaram em pupas. Os adultos emergidos das pupas foram transferidos para gaiolas e mantidos com dieta açucarada e umidade. Novamente foi realizada uma alimentação sanguínea para gerações seguintes. Foi analisado o conteúdo e o perfil protéico da glândula salivar de fêmeas de L. longipalpis em jejum e alimentadas com sangue em diferentes dias. Nossos resultados mostram que a criação de flebótomos é viável em laboratório. Normalmente ocorre uma diminuição na produção dos flebótomos da colônia devido ao uso constante de fêmeas para extração de glândulas salivares. A presença de fungos, ácaros e microfilárias na colônia também afetam a produção. Por esses motivos é importante a introdução de flebótomos do campo na colônia periodicamente. Foi visto também que o conteúdo protéico da glândula salivar de fêmeas em jejum aumentou no terceiro dia após a emergência do adulto, não variando muito até o sétimo dia e que um dia após a alimentação sanguínea, diminuiu, porém essa concentração aumentou nos dias subseqüentes.
Publicado ou submetido? não Situação: Em execução
Palavras-chave: 1: flebótomo 2: Lutzomyia longipalpis 3: glândula salivar Título do projeto do orientador: Estudo protéico da saliva de Lutzomyia longipalpis (Lutz & Neiva) (Diptera: Phlebotominae) e o efeito da seus extratos utilizando o modelo de bolsão inflamatório.
Programa/projeto: CNPq - FIOCRUZ/PIBIC Apoio financeiro: Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Biologia Geral 2.01.00.00-0 Sub-Área: Especialidade: BIOATIVIDADE DE PRODUTOS NATURAIS ISOLADOS DE PLANTAS SOBRE A FISIOLOGIA DE Chrysomya megacephala (Fabricius 1794)(Diptera: Calliphoridae). Aluno: Camila Diniz Ribeiro Nogueira Nome em cit. bibliográficas: NOGUEIRA, Camila D. R. Vínculo Institucional: Fiocruz Tipo de Bolsa: CAPES E-mail: camiladrn@bol.com.br Curso: Mestrado em Biologia Parasitária Ano de Ingresso: 2005 Orientador(a): Marise Maleck de Oliveira Cabral Nome em cit. bibliográficas: CABRAL, Marise M. O. Segundo(a) orientador(a): Rubens Pinto de Mello Nome em cit. bibliográficas: MELLO, Rubens P. Pesquisador(a) Colaborador(a): Margareth Maria de Carvalho Queiroz Nome em citações bibliográficas: QUEIROZ, Margareth M. C. Área de Concentração: Entomologia Evento: IX Jornada Científica da Pós-Graduação
Resumo:
O controle químico de insetos em ambiente urbano é dificultado devido ao perigo de contaminação do homem, animais e ambiente. A pressão ambiental e o rápido desenvolvimento da resistência dos insetos pelos inseticidas convencionais têm promovido uma procura por novos métodos de controle de pestes. As plantas têm produzido, em conseqüência da evolução e adaptação do ambiente, uma variedade de substâncias bioativas importantes que interferem no comportamento dos insetos, incluindo a regulação do crescimento de insetos, o impedimento da alimentação e repelência, atividade inseticida e outras. Chrysomya megacephala é uma espécie de mosca varejeira de grande importância médico-sanitária e veterinária, que pode causar miíases secundárias, servir de vetor do poliovírus tipo III, Salmonella sp., Shiguella sp. e também ser transmissora de Toxoplasma gondii, além de outros patógenos causadores de doenças nos animais e no homem. Este estudo pretende verificar a ação de produtos naturais isolados de plantas, que possam alterar o desenvolvimento do ciclo biológico e modificar a capacidade vetorial dos dípteros muscóides na transmissão de doenças ao homem. As substâncias isoladas de plantas serão dissolvidas em acetona, diluídas em NaCl (1:4) e avaliadas nas diferentes concentrações, de acordo com a bioatividade encontrada. As drogas serão utilizadas por tratamento tópico sobre o corpo das larvas L1 ou na massa de ovos. No tratamento por contato serão aplicadas sobre papel de filtro umedecido (NaCl) revestindo as placas de Petri. E no tratamento oral serão misturadas à dieta artificial ou à dieta de carne bovina moída putrefata na proporção 1g/larva. As colônias serão estabelecidas a partir de adultos de Chrysomya megacephala, coletados no Município de Seropédica, RJ, que serão mantidos no laboratório de controle de insetos vetores, do departamento de Biologia/FIOCRUZ. Todas as etapas serão realizadas em condições de laboratório, à temperatura de 27±1oC, 60±10% URA. As moscas serão observadas quanto à longevidade, mortalidade e potencial biótico. E os resultados analisados através de análises estatísticas: ANOVA e teste de Tuckey.
Palavras-chave: 1: Chrysomya megacephala 2: Produtos Naturais 3: Dipteros muscóides Apoio financeiro: 1: Fiocruz 2: Fiocruz 3:
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Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Biologia Geral 2.01.00.00-0 Sub-Área: Especialidade: Caracterização da resposta granulomatosa contra Leishmania (Viannia) braziliensis no modelo rhesus (Macaca mullatta) da leishmaniose tegumentar humana. Aluno: Camila Souza Lemos Nome em cit. bibliográficas: SOUZA-LEMOS, Camila Vínculo Institucional: Tipo de Bolsa: FIOCRUZ E-mail: cslemos@ioc.fiocruz.br Curso: Mestrado em Biologia Celular e Molecular Ano de Ingresso: 1998 Orientador(a): Gabriel Grimaldi Júnior Nome em cit. bibliográficas: GRIMALDI-JÚNIOR, Gabriel Segundo(a) orientador(a): Renato Porrozzi Nome em cit. bibliográficas: PORROZZI, Renato Pesquisador(a) Colaborador(a): Nome em citações bibliográficas: Área de Concentração: Imunologia Evento: IX Jornada Científica da Pós-Graduação
Resumo:
A evolução clínico-patológica da leishmaniose tegumentar (LT) reflete, em última análise, as respostas inatas e adaptativas do hospedeiro infectado, influenciando assim a natureza da resposta inflamatória (no caso, refletida nos tipos de células inflamatórias recrutadas e suas interações celulares no sítio das lesões) responsável, seja pela manutenção ou resolução das lesões. A resistência ou susceptibilidade imunológica do hospedeiro está associada com respostas específicas mediadas por linfócitos seja de tipo Th1 (IL-2, IFN³) ou Th2 (IL-4, IL-5, IL-10), respectivamente. Em estudo recente [Parasitology 2003, 127: 437-447], registramos a capacidade do primata Macaca mulatta de reproduzir a doença cutâneo-mucosa humana causada pela L. (V.) braziliensis. Em outro estudo (Mem. Inst. Oswaldo Cruz 2000, 95: 209-216), demonstramos que os tipos de células inflamatórias presentes em lesões cutâneas induzidas pela L. (L.) major em macacos rhesus são similares ao observado na LT humana, variando também no decurso da infecção. Neste estudo, examinamos o decurso da resposta granulomatosa contra L. (V.) braziliensis em macacos rhesus, procurando estudar com ênfase especial o papel das moléculas de adesão na cinética de recrutamento celular no sítio das lesões. A comparação dos dados com a resposta imune sistêmica permitirá entender a dinâmica e a inter-relação destes compartimentos e, assim, estabelecer parâmetros predicativos de resistência imune contra a doença.
Objetivos específicos:
1. Com estudos morfológicos seqüenciais (usando microscopia ótica, ultraestrutural e imunohistoquímica) caracterizar (i) as populações celulares e (ii) a expressão de moléculas de adesão [LFA-1, ICAM-1, Mac-1, L-selectina] componentes do processo inflamatório reacional à presença de Leishmania (Viannia) braziliensis na lesão cutânea induzida experimentalmente em macacos rhesus.
2. Em diferentes fases evolutivas da infecção experimental, determinar os níveis de expressão de citocinas (e de seus receptores específicos) em (i) leucócitos circulantes, (ii) em populações celulares isoladas de linfonodos de drenagem e (iii) diretamente nas lesões tegumentares dos animais experimentais. Palavras-chave: 1: Leishmaniose experimental (Macaca mulatta) 2: Leishmania (Viannia) braziliensis 3: Imunopatologia Apoio financeiro: 1: PRONEX 2: Fiocruz 3: Melina and Bill Gates Foundation
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Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Biologia Geral 2.01.00.00-0 Sub-Área: Especialidade: Avaliação do efeito da poluição na Baía de Guanabara usando Hidrocarbonetos Policíclicos Aromáticos em bile de peixes. Aluno: Carla de Albuquerque Nome em cit. bibliográficas: ALBUQUERQUE, Carla Vínculo Institucional: Mestanda Tipo de Bolsa: CAPES E-mail: carla.bio@ensp.fiocruz.br Curso: ENSP - Mestrado em Saúde Pública Ano de Ingresso: 2005 Orientador(a): Ana Rosa Linde Arias Nome em cit. bibliográficas: LINDE-ARIAS, Ana R. Segundo(a) orientador(a): Nome em cit. bibliográficas: Pesquisador(a) Colaborador(a): Nome em citações bibliográficas: Área de Concentração: Toxicologia Ambiental e Ocupacional Evento: IX Jornada Científica da Pós-Graduação
Resumo:
Os Hidrocarbonetos Policiclicos Aromáticos (PAHs), são substâncias altamente lipofílicas e que estão presentes na atmosfera, na água, no solo, em plantas, assim como em animais e em seus produtos. Os PAHs presente em quase todos os ambientes marinhos são derivados da poluição petroquímica e do processo de combustão incompleta, sendo formados pela pirólise do carbono ou do petróleo e de outros processos como a eletrólise. O processo de biotransformação dos PAHs resultam em metabólitos que se concentram em fluidos do corpo, tecidos e excretas, além do meio ambiente. Estas substâncias merecem grande atenção, pois são compostos que têm características carcinogênicas, mutagênicas e teratogênicas. A área de estudo foi a Baía de Guanabara (BG), cuja região tem grande índice de despejo de inúmeras substâncias tóxicas, inclusive de PAHs, pois é uma área que envolve resíduos industriais e domésticos Neste estudo serão analisados metabólitos de PAHs em bile de peixes, como bioindicadores de efeito da poluição por esses compostos nos seres vivos que habitam esse ecossistema aquático. Serão coletadas várias espécies de peixes que permitam diferenciar os níveis de exposição. O arrasto será feito em diferentes pontos da BG com distintos níveis de poluição. As amostras serão levadas para o laboratório para análise dos parâmetros biológicos, sacrificados para a retirada das biles. As analises de PAHs e seus metabótitos serão realizadas por fluorimetria sincronizada; método que possui uma grande sensibilidade e reduz erros experimentais, além de ser uma técnica simples, rápida e adequada para uma rotina de monitoramento de poluentes orgânicos.
Palavras-chave: 1: Hidrocarbonetos Policíclicos Aromáticos 2: Baía de Guanabara 3: Fluorimetria Sincronizada Apoio financeiro: 1: CAPES 2: 3:
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Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Biologia Geral 2.01.00.00-0 Sub-Área: Especialidade: Effects of azadirachtin on the biology of Lutzomyia longipalpis females, vector of visceral leishmaniases in Brazil Aluno: Claudia Alves de Andrade Coelho Nome em cit. bibliográficas: ANDRADE-COELHO, Claudia A. Vínculo Institucional: CNPq Tipo de Bolsa: CNPq E-mail: rabbit@ioc.fiocruz.br Curso: Doutorado em Biologia Parasitária Ano de Ingresso: 2003 Orientador(a): Elizabeth Ferreira Rangel Nome em cit. bibliográficas: RANGEL, Elizabeth F. Segundo(a) orientador(a): Marcelo Salabert Gonzalez Nome em cit. bibliográficas: GONZALEZ, Marcelo S. Pesquisador(a) Colaborador(a): Nataly Araujo de Souza Nome em citações bibliográficas: SOUZA, Nataly A. Área de Concentração: Vetores Evento: IX Jornada Científica da Pós-Graduação
Resumo:
The triterpenoid azadirachtin (AZA), isolated from seeds of the neem tree (Azadirachta indica) (Fig. 1), is known as a compound with antifeedant properties, leading to high mortality and interrupting the growth of insects and nematodes; it is thus considered efficient in controlling agricultural pests, with no apparent toxicity to vertebrates (Wathen 1979, Jacobson 1986, Rembold 1987, 1989).
Research has focused on the impact of applying AZA to the sand fly vectors of leishmaniases, namely Lutzomyia longipalpis, the vector for Leishmania (Leishmania) infantum chagasi in the Americas. It has recently been demonstrated that AZA fed to L. longipalpis larvae blocks their metamorphosis in the second instar, in addition to causing a considerable mortality rate, depending on the dose applied (Andrade-Coelho et al. 2004). Given the neuroregulatory action of AZA, studies have increasingly focused on this compounds effect on adult L. longipalpis in association with a sugar diet.
Research is under way on sand fly specimens from the Laboratory of Leishmaniases Vectors at the Oswaldo Cruz Institute. Winged forms (batches of 30 females) were treated with doses of 0.01, 0.1, 1.0, and 10 mg of AZA (Sigma Co)/ml in ethanol-saline (1:4) for each ml of sugar solution. The batches treated with 1.0 and 10mg, only 18 females, performed oviposition in the 10st day after sugar solution (Fig. 2), with an individual mean of 23.5% of eggs laid, as compared to the control group, in which some 95% of the females laid an average of 41 eggs each (Fig. 3). In this experiment, a reduced hatching rate was also observed in the eggs in the batches treated. No apparent antifeedant effect was observed.
These observations suggest that AZA can act effectively in sand fly population control. Future stages of the research will evaluate aspects of the Leishmania-invertebrate host interaction.
Palavras-chave: 1: Lutzomyia longipalpis 2: Azadirachtin 3: visceral leishmaniases Apoio financeiro: 1: Fiocruz 2: CNPq 3: FAPERJ
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Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Biologia Geral 2.01.00.00-0 Sub-Área: Especialidade: Estudo dos fatores reguladores da fibrose durante a cardiomiopatia chagásica experimental Aluno: Cláudia Magalhães Calvet Nome em cit. bibliográficas: CALVET, Cláudia M. Vínculo Institucional: Tecnologista júnior Tipo de Bolsa: Sem Bolsa E-mail: claudiacalvet@yahoo.com Curso: Doutorado em Biologia Parasitária Ano de Ingresso: 2003 Orientador(a): Mirian Cláudia de Souza Pereira Nome em cit. bibliográficas: PEREIRA, Mirian C. S. Segundo(a) orientador(a): Tânia Cremonini de Araújo-Jorge Nome em cit. bibliográficas: ARAÚJO-JORGE, Tânia C. Pesquisador(a) Colaborador(a): Nome em citações bibliográficas: Área de Concentração: Evento: IX Jornada Científica da Pós-Graduação
Resumo:
A infecção pelo Trypanosoma cruzi é uma importante manifestação de cardiomiopatia na América Latina. Embora fibrose cardíaca seja evidenciada na cardiomiopatia chagásica, cardiomiócitos infectados pelo T. cruzi apresentam redução e/ou reorganização de componentes de matriz extracelular (MEC; Calvet e cols., 2003). Níveis elevados de TGF-² foram evidenciados na doença de Chagas (Waghabi e cols., 2002). No entanto, o papel do TGF-beta na regulação da expressão de MEC em cardiomiócitos infectados pelo T. cruzi ainda não foi elucidado. Para investigar o envolvimento do TGF-beta na modulação da expressão de MEC, culturas de cardiomiócitos normais e infectados pelo T. cruzi, cepa Y, foram tratadas com 5, 10 e 15 ng/ml de TGF-². A distribuição de fibronectina (FN), laminina (LN) e do receptor de TGF-² do tipo II (TRII) foi revelada por imunofluorescência indireta e as amostras analisadas por microscopia de varredura confocal a laser. Nossos dados demonstraram que o tratamento com TGF-² induz aumento na expressão de FN em culturas de cardiomiócitos infectadas ou não pelo T. cruzi. No entanto, um remodelamento de FN não foi obtido em células altamente infectadas, onde a expressão deste componente de matriz extracelular permaneceu reduzida. Em contraste, uma reorganização da matriz de LN em células altamente infectadas foi obtida após o tratamento com TGF-², apresentando uma distribuição similar aos controles. A modulação de receptores de superfície tem sido evidenciada na infecção pelo T. cruzi, assim, investigamos a distribuição e expressão de TRII durante interação T. cruzi-cardiomiócitos. TRII encontra-se distribuído num padrão estriado e co-localizado com costâmeros em cardiomiócitos, sugerindo sua ativação em domínios subcelulares específicos. Entretanto, a infecção pelo T. cruzi causou uma redistribuição de TRII, gerando uma distribuição difusa de TRII em cardiomiócitos infectados. Amastigotas intracelulares apresentaram intenso sinal para TRII. O tratamento com TGF-² elicitou um aumento da freqüência de estriações de TRII em culturas não infectadas, mas não resultou em alterações na expressão de TRII nas células infectadas. Palavras-chave: 1: Trypanosoma cruzi 2: fibrose 3: cardiomiócito Apoio financeiro: 1: Fiocruz 2: FAPERJ 3:
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Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Biologia Geral 2.01.00.00-0 Sub-Área: Especialidade: Distribuição e expressão de junções comunicantes de cardiomiócitos em infecção in vitro por Trypanosoma cruzi Aluno: Daniel Adesse Pedra Martins Nome em cit. bibliográficas: ADESSE, Daniel Vínculo Institucional: Bolsista Tipo de Bolsa: Outra E-mail: daniel.adesse@gmail.com Curso: Mestrado em Biologia Celular e Molecular Ano de Ingresso: 2005 Orientador(a): Maria de Nazareth Meirelles Nome em cit. bibliográficas: MEIRELLES, Maria N. Segundo(a) orientador(a): Nome em cit. bibliográficas: Pesquisador(a) Colaborador(a): Nome em citações bibliográficas: Área de Concentração: Biologia Celular Evento: IX Jornada Científica da Pós-Graduação
Resumo:
O tecido muscular cardíaco é composto por células excitáveis que apresentam, caracteristicamente, contratilidade autônoma e sincronizada. Para isto, contam com um sistema de estruturas especializadas, dentre elas retículo sarcoplasmático, túbulos T, canais de Cálcio e junções comunicantes (Gap Junctions), que permitem a despolarização e repolarização de sua membrana plasmática repetidas vezes. Junções do tipo Gap (Gj) são especializações de membrana que formam canais entre duas células acopladas. Cada canal é formado por dois hemicanais (conexons), cada um cedido por uma célula do par sendo cada conexon, um hexâmero da proteína transmembrana conexina.Cardiopatias que apresentam em seu quadro clínico alterações eletrofisiológicas como arritmia, cardite ou fibrose, foram caracterizadas alterações na distribuição de placas de Gj pelo tecido afetado e na correta expressão de conexina 43, principal isoforma encontrada no tecido cardíaco.A cardiopatia chagásica, causada pela infecção do hospedeiro vertebrado pelo Trypanosoma cruzi, apresenta uma fase aguda, inicial, com alta parasitemia, infiltrados inflamatórios e alterações eletrocardiográficas. Na fase crônica, o quadro é de fibrose, miocardite e arritimia.O estudo in vitro da interação T. cruzi célula hospedeira é de extrema importância para o maior entendimento, principalmente, da biologia celular da infecção e caracterizar os danos causados à célula hospedeira. Com isso, torna-se possível vislumbrar possíveis alternativas farmacológicas para o controle da infecção. O presente estudo propõe-se a estudar o comportamento das junções comunicantes durante a infecção in vitro de cardiomiócitos por T. cruzi. Resultados preliminares com imunocitoquímica ultraestrutural e imunofluorescência indicaram que há uma perda na marcação para conexina 43 em cardiomiócitos infectados, desde 24 horas até o fim do ciclo intracelular com 96 horas. Estudos posteriores serão realizados no intuito de esclarecer o comportamento das junções gap nos momentos iniciais da infecção e se há recuperação no padrão de distribuição da conexina 43 após o controle da infecção com o uso de substâncias conhecidamente tripanocidas. Palavras-chave: 1: junções celulares 2: interação parasita-célula 3: biologia celular Apoio financeiro: 1: CNPq 2: Fiocruz 3: FAPERJ
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Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Biologia Geral 2.01.00.00-0 Sub-Área: Especialidade: Schistosoma mansoni Triose Phosphate Isomerase Peptide Induces Th1-Type Responses in Human Cells. Aluno: Eliana A. G. Reis Nome em cit. bibliográficas: REIS, Eliana A. G Vínculo Institucional: Estudante de doutorado Tipo de Bolsa: FIOCRUZ E-mail: ereis@cpqgm.fiocruz.br Curso: Doutorado em Biologia Celular e Molecular Ano de Ingresso: 2002 Orientador(a): Mitermayer Galvão dos Reis Nome em cit. bibliográficas: REIS, Mitermayer G. Segundo(a) orientador(a): Donald Harn Nome em cit. bibliográficas: HARN, Donald Pesquisador(a) Colaborador(a): T. M. AZEVEDO , R. B. ATHANAZIO Nome em citações bibliográficas: AZEVEDO, T. M. ; ATHANAZIO, R. B. Área de Concentração: Imunologia e Biologia Celular Evento: IX Jornada Científica da Pós-Graduação
Resumo:
We evaluated the responses of T cells that had been primed by co-culture with monocyte-derived dendritic cells (DCs) from healthy donors pulsed with the multiple antigen peptide (MAP4) containing B and T cell epitopes derived from S. mansoni Triose-Phosphate Isomerase (TPI). T-cell immune responses were evaluated by phenotype expression and cytokine production in primed cells and PBMC control on day 0. The major activated T cell population was CD4+ T lymphocytes expressing the surface markers CD25, CD39, HLA-DR, CD54 and CD45RO. CD80 costimulatory molecules were expressed in a smaller B cell population. Analysis of cytokine production from cells primed with MAP4 produced TNF-± and IFN-g (3 fold higher than cells primed with RPMI control while these cells did not detect IL-5 or IL-10. Additionally, PBMC primed with MAP4 produced IFN-g associated with up regulation of B7-1 costimulatory molecules on DC population, indicating that naive PBMC differentiated into Th1-type. Taken together, these results suggest that human PBMCs primed in vitro by DCs sensitized with MAP4 were able to induce Th1 phenotype CD4+ T cells. Palavras-chave: 1: citocina 2: antigen 3: PIV Apoio financeiro: 1: NIH 2: CNPq 3:
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Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Biologia Geral 2.01.00.00-0 Sub-Área: Especialidade:
BIOATIVIDADE DE Melia azedarch SOBRE O DESENVOLVIMENTO PÓS-EMBRIONÁRIO DE Musca domestica(Linneaus, 1758)
Bolsista: Esteban Roberto Ferreira Crescente Nome em cit. bibliográficas: FERREIRA-CRESCENTE, Esteban R. Orientador(a): Marise Maleck de Oliveira Cabral Nome em cit. bibliográficas: OLIVEIRA-CABRAL, Marise M. Coorientador(a): Vanderleia Cristina de Oliveira Nome em cit. bibliográficas: OLIVEIRA, Vanderleia C. E-mail: erfc8@hotmail.com Unidade: IOC Departamento: Biologia Lab. / Núcleo: Biologia e Controle de Insetos Vetores Evento: XIII Reunião Anual de Iniciação Científica
Resumo:
Musca domestica (Diptera: Muscidae) é uma espécie sinantrópica com hábito alimentar bastante diversificado, freqüentando lixo, carcaças de animais e fezes, portando grande importância médico-sanitária, como vetor mecânico e/ou biológico de diversos patógenos. Melia azedarach (Meliaceae) é uma árvore de grande porte originária da Ásia. encontrada nos E.U.A, Ilhas Bermudas, Índia, México, Peru, Argentina e Brasil. OBJETIVO: Afim de encontrar propriedades inseticidas em Melia azedarach buscamos neste estudo observar os efeitos dos princípios ativos desta planta em dípteros. METODOLOGIA: A colônia de Musca domestica foi estabelecida a partir de adultos coletados na cidade de Guapimirim (RJ). Da extração fitoquímica das sementes de M. azedarach obteve-se os extratos Acetato de Etila (AcoEt), metanólico (MeOH), hexânico (Hex) e hexânico fase metanólica (Hex:MeOH). Os extratos foram dissolvidos em acetona e diluído em NaCl 0,15 (1:4). Para a realização dos testes foram utilizadas massas de ovos (30mg) e larvas de 1o ínstar de M. domestica, que foram divididos em grupos teste e controle, mantidos em dieta a base de carne bovina 0,5 g/larva. TRATAMENTO TÓPICO: os extratos foram aplicados diretamente sobre as larvas na concentração de 100m g/m l e nas massas de ovos nas concentração de 200m g/m l. RESULTADOS e CONCLUSÕES: O extrato Hex:MeOH apresentou 44% de mortalidade sobre as larvas. A inibição da viabilidade total de M. domestica foi demonstrada nos extratos Hex (53%) e Hex:MeOH (63%). A atividade demonstrada pelos extratos Hex e Hex:MeOH de M. azedarach sobre M. domestica, corrobora com os descritos para Locusta migratoria e Culex pipiens. Quanto a duração do período pós-embrionário de M. domestica, apresentou alteração significativa para AcoEt, MeOH, Hex e Hex:MeOH no período pupal e com os extratos Hex e Hex:MeOH no período de neolarva-adulto. O peso das pupas ficou reduzido (p de 2a a cada quadrimestre (1,0/mg/kg/3 dia) (Portaria nº 2305-12/2001). A fisioterapia a partir do Conceito Neuroevolutivo Bobath (CNB) tem como objetivo melhorar a capacidade funcional do indivíduo com disfunção do movimento através dos estudos do controle, aprendizado e aprimoramento motor. Em 2004 o programa clínico de fisioterapia do CROI/IFF foi formulado a partir da experiência do Programa de AssistÊncia Domiciliar Interdisciplinar-PADI/IFF no tratamento de uma criança com OI em 2003 utilizando um protocolo de fisioterapia matriz baseado em Russel e cols(1998). O estudo preliminar foi realizado em 05 crianças, 04 do sexo masculino e 01 do sexo feminino, com idade entre 0 e 5 anos. Os objetivos desta pesquisa qualitativa, do tipo estudo de caso, foram analisar os resultados do tratamento medicamentoso com o pamidronato dissódico na OI, a partir de uma abordagem fisioterapêutica, bem como descrever as atividades físicas e funcionais dos pacientes no ingresso ao CROI/IFF/FIOCRUZ/RJ e avaliar o desenvolvimento sensório-motor, antes e durante o tratamento clínico segundo o CNB. As avaliações foram realizadas em recinto apropriado a cada internação eletiva (ciclo da medicação) e compreenderam: mensuração dos arcos de movimentos ultilizando-se o goniômetro, observação das transições de posturas e análise dos deslocamentos para avaliar a qualidade do desenvolvimento funcional. Os resultados apontam para melhora qualitativa de todos os parâmetros avaliados além do aumento da massa óssea observado a partir das densitometrias ósseas. Não há trabalhos na literatura sobre o tratamento na Oi com o pamidrinato dissódico a partir de uma abordagem fisioterapêutico segundo o CNB. O estudo proposto parece pertinete, visto que permitirá a intervenção desde cedo na história natural da OI com consequente melhora da qualidade de vida. Palavras-chave: 1: Osteogenesis Imperfecta 2: fisioterapia neuroevolutiva 3: qualidade de vida Apoio financeiro: 1: CAPES 2: 3:
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Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Genética 2.02.00.00-5 Sub-Área: Genética Humana e Médica 2.02.05.00-7 Especialidade: Influência de fatores antropométricos e do perfil genético do sistema Renina-Angiotensina-Aldosterona na variação da pressão arterial Aluno: Silvia Regina Sampaio Freitas Nome em cit. bibliográficas: FREITAS, Silvia R. S. Vínculo Institucional: Tipo de Bolsa: FIOCRUZ E-mail: sroig@ioc.fiocruz.br Curso: Doutorado em Biologia Celular e Molecular Ano de Ingresso: 2002 Orientador(a): Pedro Hernan Cabello Acero Nome em cit. bibliográficas: CABELLO-ACERO, Pedro H. Segundo(a) orientador(a): Rodrigo Soares Moura Neto Nome em cit. bibliográficas: MOURA-NETO, Rodrigo S. Pesquisador(a) Colaborador(a): Nome em citações bibliográficas: Área de Concentração: Genética humana molecular Evento: IX Jornada Científica da Pós-Graduação
Resumo:
A hipertensão arterial essencial é uma doença poligênica e multifatorial, caracterizada pela disfunção dos mecanismos vasculares, cardíacos, renais e endócrinos que interagem entre si, e com fatores ambientais, para regular a pressão sanguínea. Dentre estes mecanismos destacam-se o Sistema Renina-Angiotensina-Aldosterona (SRAA) e o Receptor de Mineralocorticóide (RM), cujos genes são candidatos em potencial na etiologia da hipertensão essencial. O presente trabalho tem por objetivo investigar a contribuição de fatores antropométricos (sexo, idade, etnia, fumo, alcoolismo, glicose e índice de massa corporal) e de múltiplos polimorfismos presentes nos genes do SRAA (I/D, M235T, A1166C, C344T) e RM (G3514C e A4582C) na regulaçãp da pressão sanguínea. Para a realização deste trabalho foram selecionadas aleatoriamente 100 indivíduos do município de Santa Izabel do Rio Negro/ Amazonas. Desse total 32 pessoas foram classificadas como hipertensos (pressão arterial e"140/90mmHg) e 78 como normotensos (pressão sanguínea < 140/90mmHg). A análise dos parâmetros antropométricos feita pela regressão logistica mostrou que apenas o aumento da idade está associado com o aumento da pressão (pressão sistólica: R = 0.295, p = 0.002; pressão diastólica: R = 0.152, p = 0.015). Os dados genéticos foram analisados pela regresão linear - Stepwise e mostrou que somente o polimorfismo I/D está associado com a variação da pressão (t = 2.525, p = 0.013). Baseados nos resultados preliminares verificamos que a presença do polimorfismo I/D e idade são fatores de risco para o desenvolvimento da hipertensão, na população do município de Santa Izabel do Rio Negro. Palavras-chave: 1: polimorfismo 2: genética 3: hipertensão Apoio financeiro: 1: Fiocruz 2: UFRJ 3:
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Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Genética 2.02.00.00-5 Sub-Área: Genética Humana e Médica 2.02.05.00-7 Especialidade:
Estudo damutação CCR2-64I em indivíduos HTLV-I posiitvos (sintomáticos e assintomáticos) e negativos de Salvador-Bahia.
Bolsista: Taisa Manuela Bonfim Machado Nome em cit. bibliográficas: MACHADO, Taisa M. B. Orientador(a): Angelina Xavier Acosta Nome em cit. bibliográficas: ACOSTA, Angelina X. Coorientador(a): Rogério Grimaldi Sampaio Nome em cit. bibliográficas: GRIMALDI, Rogério S. E-mail: taisamanuela@hotmail.com Unidade: CPqGM Departamento: Genética Lab. / Núcleo: Laboratório Avançado de Saúde Pública Evento: XIII Reunião Anual de Iniciação Científica
Resumo:
O vírus linfotrópico para células T humanas tipo I (HTLV-I) é um retrovírus que está relacionado ao desenvolvimento de doenças inflamatórias e neurológicas. No Brasil, Salvador é a cidade com maior prevalência desta infecção. O HTLV-I apresenta bastante similaridade genética com o vírus da imunodeficiência humana tipo 1 (HIV-1), e embora já tenha sido descrito um correceptor para a entrada do HTLV-I na célula alvo, foi demonstrada uma associação entre o polimorfismo CCR2-64I, conhecidamente envolvido na patogênese da AIDS, com a infecção pelo HTLV-I.
Objetivos: Determinar a freqüência do polimorfismo CCR2-64I entre indivíduos HTLV-I positivos e negativos para analisar possíveis associações da mutação com infecção e/ou patogênese pelo HTLV-I.
Material e métodos: Analisamos 122 amostras HTLV-I positivas classificadas em sintomáticos e assintomáticos, de acordo com os dados clínicos. Além disso, utilizamos 305 amostras HTLV-I negativas como controle. A mutação CCR2-64I foi analisada por PCR quantitativo em tempo real, nas amostras positivas, e PCR seguido de RFLP nas amostras negativas. Os testes estatísticos utilizados foram Fisher e Qui-Quadrado.
Resultados: Encontramos uma freqüência alélica de 0.136 e 0.245 nos indivíduos HTLV-I negativos e positivos, respectivamente, a diferença entre estas freqüências foi estatisticamente significante (p=0.035). Entre os pacientes sintomáticos, a freqüência foi de 0.21 e nos assintomáticos 0.197.
Conclusões: Os nossos resultados sugerem que este polimorfismo não está envolvido com a patogênese, mas sim com uma maior susceptibilidade à infecção pelo HTLV-I, embora sejam necessários estudos funcionais de infecção in vitro.
Publicado ou submetido? não Situação: Em execução
Palavras-chave: 1: CCR2 2: HTLV-I 3: Polimorfismos Título do projeto do orientador: Estudo da mutação CCR2-64I em indivíduos HTLV-I positivos (sintomáticos e assintomáticos) e negativos de Salvador-Bahia.
Programa/projeto: CNPq - FIOCRUZ/PIBIC Apoio financeiro: Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Genética 2.02.00.00-5 Sub-Área: Genética Humana e Médica 2.02.05.00-7 Especialidade: Estudo da distribuição e frequência dos genótipos virais de HBV na região sudeste. Aluno: Ana Flávia Belchior de Andrade Nome em cit. bibliográficas: ANDRADE, Ana F. B. Vínculo Institucional: Aluna da Doutorado - IOC Tipo de Bolsa: Outra E-mail: afbelchior@yahoo.com Curso: Doutorado em Biologia Celular e Molecular Ano de Ingresso: 2004 Orientador(a): Cibele Rodrigues Bonvicino Nome em cit. bibliográficas: BONVICINO, Cibele R. Segundo(a) orientador(a): Nome em cit. bibliográficas: Pesquisador(a) Colaborador(a): Nome em citações bibliográficas: Área de Concentração: Biologia Molecular Evento: IX Jornada Científica da Pós-Graduação
Resumo:
A hepatite é definida como inflamação do fígado causada pela infecção pelo vírus da Hepatite B (HBV). No Brasil, estudos detectaram índice de infecção médio por HBV de 8,0% na região Amazônica, 2,5% nas regiões Centro-Oeste e Nordeste, 2,0% na região Sudeste e 1,0% na região Sul. As variantes virais do HBV são classificados em oito genótipos principais, designados de A a H, definidos pela divergência superior a 8%. No Brasil poucos estudos foram realizados para conhecer o perfil genotípico da população brasileira infectada por HBV. No presente estudo foi seqüenciado parte do gene S do HBV para genotipagem de 100 amostras de soros, coletadas em bancos de sangue de três estados da região sudeste Rio de Janeiro (39), São Paulo (24) e Espírito Santo (37). Nesse grupo de indivíduos foi identificado 3 genótipos diferentes de HBV: A (68%), D (28%) e F (4%). No estado do Rio de Janeiro 74% das amostras analisadas apresentavam o genótipo A, 18% o genótipo D e 8% o genótipo F. No estado de São Paulo 75% das amostras analisadas apresentavam o genótipo A e 25% o genótipo D, estando ausente na amostra analisada o genótipo F. No Espírito Santo 58% das amostras apresentaram o genótipo A, 40% o D e 2% o genótipo F. Atualmente temos disponíveis dados relativos ao genótipo de HBV em amostras de apenas três estados brasileiros, Rio de Janeiro, Goiás e Santa Catarina. Em todos os estudos somente os genótipos A, D e F foram encontrados. Com relação aos dados já existentes para o estado do Rio de Janeiro (59% das amostras com genótipo A, 31% genótipo D e 10% o F), nossos dados vem confirmar não só a presença desses três genótipo circulantes no estado como o fato do genótipo A ser o mais freqüente e o F o menos encontrado. Enquanto na amostra do Espírito Santo encontramos a mesma relação, ou seja, o genótipo A sendo o mais freqüente e o F o menos freqüente, na amostra de São Paulo não foi detectado o genótipo F, no entanto, nossa amostra é pequena, e mais analises já estão sendo efetuadas. Vale salientar que os dados da literatura mostram que em Goiás o genótipo D é o mais freqüente, mostrando que existe variação com relação à distribuição e freqüência dos genótipos de HBV no Brasil. Palavras-chave: 1: Hepatite 2: Hepatite B 3: genótipo Apoio financeiro: 1: Fiocruz 2: 3: Ministério da Saúde
Está inserido no PAPES 3? Não
Está inserido no PDTIS? Não
Está inserido no PDTSP? Não
Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Genética 2.02.00.00-5 Sub-Área: Genética Molecular e de Microorganismos 2.02.02.00-8 Especialidade:
BUSCA DE MARCADORES MOLECULARES PARA ANALISE DE ISOLADOS DE Plasmodium vivax DA AMAZÔNIA BRASILEIRA
Bolsista: Antônio Mauro Rezende Nome em cit. bibliográficas: REZENDE, Antonio M. Orientador(a): Cristiana Ferreira Alves de Brito Nome em cit. bibliográficas: BRITO, Cristiana F. A. Coorientador(a): Nome em cit. bibliográficas: E-mail: am.rezende@cpqrr.fiocruz.br Unidade: CPqRR Departamento: Laboratório de Malária Lab. / Núcleo: Laboratório de Malária Evento: XIII Reunião Anual de Iniciação Científica
Resumo:
A malária é uma doença causada por protozoários do gênero Plasmodium. No Brasil a maior parte dos casos de malária é causada pelo Plasmodium vivax. As estratégias de controle do parasito dependem do entendimento da variabilidade genética e da estrutura populacional do parasito, que pode ser acessada através do uso de marcadores moleculares. Já foram descritos diversos estudos sobre a variabilidade genética, estrutura de população e evolução em Plasmodium falciparum, mas em relação ao P. vivax pouca informação se encontra disponível. O objetivo deste trabalho é a busca de marcadores moleculares para análise de isolados de P. vivax da Amazônia brasileira que possam ajudar na elucidação da variabilidade genética e da estrutura das populações e conseqüentemente auxiliar na formulação de estratégias mais eficientes de combate ao parasito. Inicialmente, estamos testando nas amostras brasileiras os marcadores moleculares descritos para o P. vivax de outras regiões (Gomes et al. 2003, Am J Trop Med Hyg 69:377-9; LeClerc et al. 2004, Proc Natl Acad Sci U S A 101:14455-60), para verificar se esses marcadores são polimórficos nas nossas amostras. Estão sendo testados como marcadores moleculares 3 regiões que contém repetições em série e 2 que possuem microsatélites . Essas regiões foram amplificadas através de PCR utilizando iniciadores específicos e os fragmentos analisados em géis de agarose. Para confirmar o número de repetições está sendo feito o sequenciamento dos produtos amplificados através do seqüenciador automático de DNA MegaBace500. Os marcadores polimórficos identificados serão utilizados para tipagem de todas as amostras de diferentes regiões da Amazônia brasileira disponíveis no laboratório, através de análise em seqüenciador automático de DNA ALF utilizando o software Fragment manager"! (Amershan Pharmacia). Dos 4 marcadores testados dois demonstraram a presença de variabilidade, que está sendo confirmada pelo sequenciamento e pela análise no ALF.
Publicado ou submetido? não Situação: Em execução
Palavras-chave: 1: Plasmodium vivax 2: Marcadores moleculares 3: variabilidade genética Título do projeto do orientador: ESTUDO DA VARIABILIDADE DE Plasmodium vivax DE DIFERENTES REGIÕES DA AMAZÔNIA BRASILEIRA
Programa/projeto: FAPEMIG Apoio financeiro: FAPEMIG Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Genética 2.02.00.00-5 Sub-Área: Genética Molecular e de Microorganismos 2.02.02.00-8 Especialidade: Polimorfismo do HIV-1 no Brasil: caracterização molecular da região da integrase do gene pol Aluno: Caroline Pereira Bittencourt Passaes Nome em cit. bibliográficas: PASSAES, Caroline P. B. Vínculo Institucional: Aluno de Pós-Graduação (Mestrado) Tipo de Bolsa: CNPq E-mail: cpassaes@ioc.fiocruz.br Curso: Mestrado em Biologia Parasitária Ano de Ingresso: 2005 Orientador(a): Mariza Gonçalves Morgado Nome em cit. bibliográficas: MORGADO, Mariza G. Segundo(a) orientador(a): Nome em cit. bibliográficas: Pesquisador(a) Colaborador(a): Monick Lindenmeyer Guimarães Nome em citações bibliográficas: GUIMARAES, Monick L. Área de Concentração: Biologia Molecular Evento: IX Jornada Científica da Pós-Graduação
Resumo:
O HIV-1 exibe um alto grau de variabilidade genética, sendo classificado em grupos, subtipos, sub-subtipos e formas recombinantes circulantes. As implicações deste polimorfismo na susceptibilidade ao anti-retroviral e na imunopatogênese são ainda alvo de investigação. A integrase (IN) é a enzima chave no processo de integração do HIV ao genoma hospedeiro, estando sob intensa investigação como alvo para terapia anti-retroviral. Esta enzima é altamente conservada e não possui equivalente na célula hospedeira. Inibidores de IN vêm sendo desenvolvidos, dentre estes, os mais promissores são os Dicetoácidos (DKA). Testes clínicos fase I/II já foram iniciados, inclusive no Brasil. Além disso, a IN tem sido também incluída em protótipos vacinais e alguns epítopos imunodominantes já foram descritos. Diversos estudos sobre a caracterização molecular do HIV-1 no Brasil têm se baseado nas regiões env, gag, e na transcriptase reversa e protease do gene pol, e muito pouco se sabe sobre a diversidade genética da região da IN. Diante do desenvolvimento de medicamentos inibidores desta enzima a serem introduzidos em breve na terapia da AIDS, é de grande importância a caracterização não só do polimorfismo da IN nos subtipos circulantes no Brasil, como de se traçar a ocorrência de mutações associadas com resistência a esta classe de drogas. As amostras utilizadas neste estudo serão representativas dos subtipos B, F e C, prevalentes no Brasil. Em paralelo serão analisadas amostras de plasma de indivíduos com perfil molecular de falha terapeutica às drogas correntes. Para a amplificação da região da IN dos DNAs provirais realizaremos um nested PCR amplificando um fragmento de 1041pb utilizando um conjunto de primers desenhados baseando-se na seqüência da integrase do HXB2. Os produtos de PCR serão submetidos a sequenciamento automático (DNA Sequencer 3100 ABI), em ambos os sentidos. A edição das sequências, alinhamento e análise filogenética serão realizados com a utilização dos programas DNASTAR, CLUSTAL X e PAUP. Seqüências deduzidas de aminoácidos serão analisadas quanto à presença de mutações de resistência e quanto ao polimorfismo de epítopos imunodominantes..
Palavras-chave: 1: HIV/AIDS 2: Diversidade genética 3: Terapia anti-retroviral Apoio financeiro: 1: Sem apoio 2: 3:
Está inserido no PAPES 3? Não
Está inserido no PDTIS? Não
Está inserido no PDTSP? Não
Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Genética 2.02.00.00-5 Sub-Área: Genética Molecular e de Microorganismos 2.02.02.00-8 Especialidade:
DIAGNÓSTICO DA COCCIDIOIDOMICOSE ATRAVÉS DA TÉCNICA DE PCR COM PRIMERS ESPECÍFICOS
Bolsista: CRISTINA CARVALHAL PINTO Nome em cit. bibliográficas: PINTO, Cristina C. Orientador(a): BODO WANKE Nome em cit. bibliográficas: WANKE, Bodo Coorientador(a): CINTIA DE MORAES BORBA Nome em cit. bibliográficas: BORBA, Cíntia M. E-mail: crisbio22@yahoo.com.br Unidade: IPEC Departamento: MICRO-IMUNO-PARASITO Lab. / Núcleo: SERVIÇO DE MICOLOGIA Evento: XIII Reunião Anual de Iniciação Científica
Resumo:
Introdução: Coccidioidomicose é micose sistêmica causada pelo fungo dimórfico Coccidioides immitis. Em parasitismo se apresenta como uma esférula característica, repleta de endósporos. Em saprofitismo as colônias apresentam aspecto algodoado, inicialmente de cor branca, depois tom marrom-claro, cujo aspecto microscópico é de hifas hialinas, septadas e ramificadas, formando artroconídios intercalares, unidades infectantes de fácil dispersão aérea. O semi-árido da região Nordeste do Brasil foi recentemente incluído como área endêmica de coccidioidomicose. Por ser seu agente um microorganismo patogênico altamente infectante e de difícil caracterização precisa, é importante implantar uma técnica de identificação molecular que minimize os riscos de manipulação em laboratório. O presente estudo propõe técnica que consiste na utilização de PCR com primers para identificação do gene csa, específico de C. immitis, em cultivos e espécimes clínicos. Materiais e métodos (cultivos): Foram analisados 45 isolados de C. immitis e 12 fungos filogenética e/ou morfologicamente relacionados, que foram cultivados em meio líquido sob agitação constante. A massa obtida foi inativada sob vapor fluente e liofilizada. A extração de DNA baseou-se em criofratura com nitrogênio líquido, seguido de PCR com primers específicos. Materiais e métodos (espécimes clínicos): Foi analisado material clínico de pacientes com as seguintes micoses: aspergilose, criptococose, candidíase, histoplasmose e paracoccidioidomicose, pseudalescheriose. A extração de DNA foi realizada com DNAzol®. Não foi conseguido material clínico de casos de coccidioidomicose; assim, foi analisada uma amostra de tecido de camundongo infectado com C. immitis. Resultados (cultivos): Em 43 (95,55%) das 45 cepas de C. immitis foi detectada banda (519 pb) do gene csa, ausente em 100% dos controles, apontando boa especificidade e sensibilidade. Resultados (espécimes clínicos): através da quantificação de DNA foi demonstrada a presença de DNA fúngico, mas não foi detectada banda específica. Por isso estamos dando início ao procedimento de hibridização.
Publicado ou submetido? não Situação: Em execução
Palavras-chave: 1: Coccidioidomicose 2: Coccidioides immitis 3: Primers específicos Título do projeto do orientador: ECO-EPIDEMIOLOGIA DA COCCIDIOIDOMICOSE NO ESTADO DO PIAUÍ E IDENTIFICAÇÃO MOLECULAR DO SEU AGENTE Coccidioides immitis
Programa/projeto: CNPq - FIOCRUZ/PIBIC Apoio financeiro: Projeto CNPq nº 521141/1998-2 Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Genética 2.02.00.00-5 Sub-Área: Genética Molecular e de Microorganismos 2.02.02.00-8 Especialidade:
CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR DOS GENES ASSOCIADOS À PATOGENECIDADE DE CEPAS DE Vibrio cholerae O26 ISOLADOS DE PROCESSOS ENTÉRICOS HUMANOS NO BRASIL
Bolsista: Francisco André Marques de Oliveira Cariri Nome em cit. bibliográficas: CARIRI, Francisco A. M. O. Orientador(a): Nilma Cintra Leal Nome em cit. bibliográficas: LEAL, Nilma C. Coorientador(a): Osvaldo Pompílio de Melo Neto & Tereza Cristina Leal-Balbino Nome em cit. bibliográficas: MELO-NETO, Osvaldo P. ; LEAL-BALBINO, Tereza C. E-mail: cariri@cpqam.fiocruz.br Unidade: CPqAM Departamento: Microbiologia Lab. / Núcleo: Microbiologia Clínica e Molecular Evento: XIII Reunião Anual de Iniciação Científica
Resumo:
A emergência do Vibrio cholerae sorogrupo O139 como um segundo agente etiológico da cólera epidêmica, despertou o interesse para a estrutura patogênica dos outros sorogrupos não O1, como alerta para o surgimento de clones epidêmicos. Foram analisadas quinze cepas de V. cholerae O26, isoladas de casos humanos brasileiros. Dessas, oito apresentaram genes de virulência do V. cholerae O1, no entanto, não foi evidenciada a produção da toxina colérica (CT) pelos testes convencionais. Assim, foi proposto caracterizar molecularmente os genes associados à patogenicidade no V. cholerae O1, na tentativa de esclarecer a razão da detecção do gene codificador de CT e a não evidência da toxina. Foram realizadas reações de PCR direcionadas aos genes cep, orfU, ace, zot, ctxA, ctxB, rstA e rstC do profago CTXÆ e aos genes tcpA, toxT, int, aldA, tagA, acfB, tcpPH, tcpFJ e toxR da Ilha de Patogenicidade (VPI), regiões presentes no cromossomo maior do V. cholerae O1. Para confirmação da identidade do gene ctxA da CT, foi construída uma sonda interna ao fragmento amplificado, marcada com digoxigenina. Para evidenciar a transcrição do gene ctxA foi utilizada a RT-PCR, com a transcriptase reversa. A expressão da CT será comprovada por Western-Blot. As amplificações por PCR permitiram selecionar oito cepas de V. cholerae O26, que apresentaram a região core do profago CTXÆ completa. Duas dessas cepas amplificaram, também, os fragmentos do tamanho esperado para os genes da VPI. O segmento do gene ctxA nas oito cepas foi reconhecido pela sonda fria, confirmando a identidade do gene ctxA de V. cholerae O1. Através do RT-PCR verificou-se que três cepas não apresentam o mRNA correspondente ao gene ctxA. Pretende-se repetir este experimento em meio AKI para confirmação do resultado. No Western-Blot, aquelas duas cepas, que amplificaram os genes da VPI, expressaram a toxina CT quando crescidas sob as condições de cultivo do meio AKI. Baseado neste resultado, as condições adequadas para expressão da CT estão sendo padronizadas e os genes serão seqüenciados.
Publicado ou submetido? não Situação: Em execução
Palavras-chave: 1: Vibrio cholerae 2: profago CTXÆ 3: Ilha de Patogênicidade de Vibrio Título do projeto do orientador: Padronização de métodos de diagnóstico e tipagem de Vibrio cholerae e de outras bactérias de interesse regional
Programa/projeto: CNPq - FIOCRUZ/PIBIC Apoio financeiro: CNPq, CPqAM Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Genética 2.02.00.00-5 Sub-Área: Genética Molecular e de Microorganismos 2.02.02.00-8 Especialidade: CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR E GENOTIPAGEM DE CEPAS DO VÍRUS DA HEPATITE B CIRCULANTES NO BRASIL. Aluno: Francisco Campello do Amaral Mello Nome em cit. bibliográficas: MELLO, Francisco C. A. Vínculo Institucional: Bolsista Tipo de Bolsa: CNPq E-mail: fcamello@superig.com.br Curso: Mestrado em Biologia Celular e Molecular Ano de Ingresso: 2003 Orientador(a): Selma de Andrade Gomes Nome em cit. bibliográficas: GOMES, Selma A. Segundo(a) orientador(a): Nome em cit. bibliográficas: Pesquisador(a) Colaborador(a): Nome em citações bibliográficas: Área de Concentração: Virologia Evento: IX Jornada Científica da Pós-Graduação
Resumo:
Os isolados do virus da hepatite B (HBV) estão classificados em oito genótipos, designados de A a H. Entre tais genótipos, A, D e F são aqueles comumente encontrados circulando no Brasil. Recentemente, nosso laboratório desenvolveu um método de genotipagem por RFLP que permitiu a distinção de 25 perfis de RFLP dos oito genótipos utilizando um único amplicon (região pré-S/S, 1099 pb). Trezentas e três amostras de soro positivo para o HBsAg de candidatos à doação de sangue de diferentes regiões do Brasil foram genotipadas: Região Norte/Nordeste: Amazonas, 35 isolados apresentaram a seguinte distribuição: genótipo A (53%), genótipo D (29,4%) e genótipo F (17,6%). Amapá, 13 isolados, A (23,1%), D (53,8%) e F (23,1%); Pará, 36 isolados, A (88,6%), D (8,6%) e F (2,8%); Pernambuco, 24 isolados, A (54,2%), D (16,6%) e F (29,2%). Região Sudeste: Rio de Janeiro, 48 isolados; A (63%), D (17,4%) e F (19,6%). São Paulo, 10 isolados, A (70%) e D (30%). Região Centro-Oeste: Mato Grosso, 55 isolados, A (45,4%), D (43,6%) e F (11%). Mato Grosso do Sul, 31 isolados, A (40%), D (53,3%) e F (6,7%). Goiás, 19 isolados, A (50%), D (50%). Região Sul: Santa Catarina, 39 isolados, A (15,8%) e D (84,2%). O método permitiu a divisão dos isolados de genótipo A, D e F em 13 perfis, confirmando a alta diversidade genética entre os isolados brasileiros. Entre esses perfis, quatro (AI-AIV) pertenciam ao genótipo A. Cepas do genótipo D e F foram classificadas em cinco (DI-DV) e quatro (FI-FIII, FV) perfis, respectivamente. Recentemente, nosso grupo de pesquisa mostrou que isolados dos perfis AI e AII se agruparam no subgrupo Aa (altamente prevalente na África). A alta proporção de isolados destes perfis encontrada (138/153; 90.2%) sugere uma origem africana para um grande número de HBVs brasileiros. O genótipo D apresenta uma ampla distribuição ao redor do mundo e é o genótipo mais comum na região Sul e Centro-Oeste do Brasil. O genótipo F, considerado o genótipo original da população ameríndia, apresentou uma baixa prevalência no Brasil, contrastando com o descrito em outros países latino-americanos. Palavras-chave: 1: HBV 2: Genotipagem 3: RFLP Apoio financeiro: 1: CNPq 2: 3:
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Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Genética 2.02.00.00-5 Sub-Área: Genética Molecular e de Microorganismos 2.02.02.00-8 Especialidade: Geração e análise comparativa de seqüências genômicas de Trypanosoma rangeli SC58. Aluno: Glauber Wagner Nome em cit. bibliográficas: WAGNER, Glauber Vínculo Institucional: Mestrando Tipo de Bolsa: CNPq E-mail: glauber@ioc.fiocruz.br Curso: Mestrado em Biologia Celular e Molecular Ano de Ingresso: 2004 Orientador(a): Alberto Martin Rivera Dávila Nome em cit. bibliográficas: DÁVILA, Alberto M. R. Segundo(a) orientador(a): Edmundo Carlos Grisard Nome em cit. bibliográficas: GRISARD, Edmundo C. Pesquisador(a) Colaborador(a): Nome em citações bibliográficas: Área de Concentração: Bioinformática Evento: IX Jornada Científica da Pós-Graduação
Resumo:
Trypanosoma rangeli é um protozoário flagelado da Família Trypanosomatidae, Ordem Kinetoplastida, distribuído nas Américas central e do Sul, em simpatria com o T. cruzi, agente etiológico da Doença de Chagas. A alta identidade na constituição antigênica solúvel pode acarretar resultados falso-positivos em exames sorológicos para a doença de Chagas. Visando aprofundar os estudos da biologia do T. cruzi e obter novos marcadores iniciou-se mapeamento genético e seqüenciamento genômico de T. cruzi, porém isso não tem ocorrido com T. rangeli por se tratar de uma espécie não patogênica a mamíferos. Duas metodologias podem ser úteis na descoberta de genes, ESTs (Expressed sequence tags) e GSS (Genome Sequence Survey) ambas com custos baixos e efetivos para as finalidades citadas. A primeira consiste em seqüenciar os cDNAs, sintetizado a partir do mRNA, a segunda, procura explorar o genoma total do organismo, através da fragmentação e seqüenciamento randômico do DNA. Esta última independe do estágio de desenvolvimento do organismo e tem se demonstrado uma excelente ferramenta de busca de genes. Com o intuito de encontrar genes úteis ao diagnóstico diferencial e/ou alvo para quimioterápicos, iniciamos a construção de bibliotecas genômicas utilizando a metodologia de GSS, uma através da sonicação do genoma e outra através da digestão parcial do genoma com 3 enzimas, Sau3AI, BamHI e EcoRI. Os fragmentos entre 1.5-3Kb são selecionados e clonados em vetor pUC18 e transformados em bactéria DH5a (Escherichia coli), ambas em estágio final de desenvolvimento. Paralelamente, desenvolvemos um novo software para a análise das seqüências, GARSA (Genomic Analysis Resources for Sequence Annotation), o mesmo que se encontra em processo de publicação. O GARSA utiliza banco de dados MySQL para armazenar as seqüências e resultados das análises semi-automática utilizando feramentas de bioinformática, Phred/Phrap, CAP3, Glimmer, YACOP, BLAST, RPS Blast, Intepro, Emboss Package, ClustalW e Phylip. Parte destes são rodados de maneira automática após a submissão do arquivo de cromatogramas. Os aplicativos foram implementados no sistema através de scripts PERL, utilizando módulos BioPerl.
Palavras-chave: 1: Trypanosoma rangeli 2: GSS 3: Bioinformática Apoio financeiro: 1: CNPq 2: Outros 3: IAEA
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Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Genética 2.02.00.00-5 Sub-Área: Genética Molecular e de Microorganismos 2.02.02.00-8 Especialidade:
Investigação dos genes responsáveis pela produção de enterotoxinas estafilocócicas através da PCR-Multiplex
Bolsista: Isabelle da Silva Luz Nome em cit. bibliográficas: LUZ, Isabelle S. Orientador(a): Tereza Cristina Leal Balbino Nome em cit. bibliográficas: LEAL-BALBINO, Tereza C. Coorientador(a): Manuela Figueiroa Lyra de Freitas Nome em cit. bibliográficas: FREITAS, Manuela F. L. E-mail: isabelle_luz@ig.com.br Unidade: CPqAM Departamento: Microbiologia Lab. / Núcleo: Microbiologia Clínica e Molecular Evento: XIII Reunião Anual de Iniciação Científica
Resumo:
O S. aureus se destaca como responsável por intoxicações alimentares, assumindo relevância para saúde pública, devido a sua veiculação ao homem, através do leite e derivados que podem conter enterotoxinas termoresistentes pré-formadas. As intoxicações alimentares são caracterizadas por vômitos, diarréia, dor abdominal, cefaléia, desidratação. O objetivo deste estudo foi pesquisar Staphylococcus spp em amostras de leite mastítico isolados na região Agreste de Pernambuco, investigar a presença dos genes responsáveis pela produção das enterotoxinas, delinear a sensibilidade antimicrobiana e realizar tipagem molecular dos S. aureus. Foram analisadas amostras de leite de 11 propriedades para identificação dos Staphylococcus spp através de provas bioquímicas. Foram investigados os genes sea, seb, sec, sed e see responsáveis pela produção das enterotoxinas através da PCR-Multiplex. A tipagem molecular dos S. aureus foi realizada por PCR através da análise do polimorfismo do gene da coagulase (coa). Em 244 amostras de leite foram isolados: 172 Staphylococcus coagulase negativa, 65 S. aureus e outros sete Staphylococcus coagulase positiva. Os antibióticos mais eficazes foram vancomicina com 100% de eficácia e norfloxacina com 96%. A presença de estafilococos resistentes é um sério problema para saúde pública, já que o leite e derivados são importantes fontes de alimentação humana. Nenhum dos 81 Staphylococcus spp analisados possuíam os genes para as enterotoxinas, apenas amplificando os genes nas cepas padrões. A análise do gene coa dos 56 S. aureus, permitiu distribuí-los em três perfis genotípicos (P1=750pb, P2=1000pb, P3=700pb), sugerindo, que um número de clones restritos é responsável pelos casos de mastite na região Agreste de Pernambuco e demonstrou a disseminação de alguns clones nesta área, mostrando que é possível monitorar a infecção causada por S. aureus; e apesar do não isolamento de estafilococos portadores dos genes sea-see, um manejo higiênico sanitário adequado deve ser adotado nas propriedades estudadas, já que a presença de Staphylococcus spp foi freqüente nas amostras de leite analisadas.
Publicado ou submetido? não Situação: Em execução
Palavras-chave: 1: Staphylococcus spp 2: enterotoxinas 3: coagulase Título do projeto do orientador: Caracterização Molecular de Staphylococcus spp isolados de leite
Programa/projeto: CNPq - FIOCRUZ/PIBIC Apoio financeiro: Banco do Nordeste Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Genética 2.02.00.00-5 Sub-Área: Genética Molecular e de Microorganismos 2.02.02.00-8 Especialidade: Caracterização Molecular de Genotipos Incomuns de Rotavírus Detectados em Belém, Pará. Aluno: Joana D´Arc Pereira Mascarenhas Nome em cit. bibliográficas: MASCARENHAS, Joana D. P. Vínculo Institucional: Instituto Evandro Chagas, Secretaria de Vigilância em Saúde, MS Tipo de Bolsa: Outra E-mail: joanamascarenhas@iec.pa.gov.br Curso: Doutorado em Biologia Parasitária Ano de Ingresso: 2002 Orientador(a): José Paulo Gagliardi Leite Nome em cit. bibliográficas: LEITE, Jósé P. G. Segundo(a) orientador(a): Alexandre da Costa Linhares Nome em cit. bibliográficas: LINHARES, Alexandre C. Pesquisador(a) Colaborador(a): Nome em citações bibliográficas: Área de Concentração: Virologia Evento: IX Jornada Científica da Pós-Graduação
Resumo:
Introdução: Os rotavírus do grupo A ocasionam dois milhões de hospitalizações/ano por diarréia grave e desidratação e 440.000 óbitos entre crianças de até 5 anos. Pertence à família Reoviridae, são constituídos por RNA de fita dupla (dsRNA) com 11 segmentos, que codificam seis proteínas estruturais e cinco não estruturais. As conbinações binárias comuns ou usuais G1P[8], G2P[4], G3P[8], G4P[8] e G9P[8] são responsáveis pela maioria das infecções, sendo que as incomuns ocorrem principalmente nos países em desenvolvimento. Objetivos: Caracterização genotípica de amostras não usuais de rotavírus obtidas de crianças de Belém, Pará. Material e Métodos: Cento e vinte e quatro espécimes de rotavírus incomuns obtidos no período de 1990 a 2003 foram analisados. Os dsRNA foi extraído das suspensões fecais, amplificado pela RT-PCR para os genes VP4, VP6, VP7 e NSP4, purificado, sequenciado com o kit Big Dye Terminator e analisado em sequenciador automático ABI Prism 3100. As seqüências foram alinhadas e editadas no programa BIOEDIT, comparadas com o banco de genes no programa BLAST e as árvores filigenéticas construídas no programa MEGA 3. Resultados: A árvore filogenética do gene VP7 das 26 amostras de neonatos mostrou homologia de 92,1% a 93,5%, quando comparados aos G2 africanos e divergência de 6,3% e 8,3% entre o G2P[6] e G2P[4], respectivamente. As amostras P[6] agruparam formando um linhagem distinta dentro de um grupo maior ( valor de confiabilidade da árvore inferida de 99%). A maioria das amostras agrupou no genotipo A de NSP4 com homologia de 100%, com exceção da RN-150 que agrupou no genotipo B e divergiu em 23%, assemelhando-se mais aas amostras de origem suína OSU-Po e RMC321, esta última, isolada a partir de um episódio de gastroenterite humano. Análise do gene VP7 mostrou valores de confiabilidade de 100% (G1, G2 e G9) e 99% (G4), enquanto que, no gene VP4, os valores variaram de 98% a 100% para P[4], P[6] e P[8]. Conclusão: A análise filogenética dos gene VP4, VP7 e NSP4 de neonatos mostrou elevada homologia apesar dos diferentes cursos clínicos apresentados. Palavras-chave: 1: Rotavírus 2: Gastroenterites 3: Crianças Apoio financeiro: 1: Outros 2: Fiocruz 3: FUNTEC, IEC-SVS
Está inserido no PAPES 3? Não
Está inserido no PDTIS? Não
Está inserido no PDTSP? Não
Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Genética 2.02.00.00-5 Sub-Área: Genética Molecular e de Microorganismos 2.02.02.00-8 Especialidade:
MÉTODOS MOLECULARES APLICADOS AO ESTUDO DE LISTERIA MONOCYTOGENES.
Bolsista: Josiane Gomes de Moura Nome em cit. bibliográficas: MOURA, Josiane G. Orientador(a): Nilma Cintra Leal Nome em cit. bibliográficas: LEAL, Nilma C. Coorientador(a): Tereza Cristina Leal-Balbino Nome em cit. bibliográficas: LEAL-BALBINO, Tereza C. E-mail: josi_gomes@click21.com.br Unidade: CPqAM Departamento: MICROBIOLOGIA Lab. / Núcleo: MICROBIOLOGIA CLÍNICA E MOLECULAR Evento: XIII Reunião Anual de Iniciação Científica
Resumo:
A bactéria Listeria monocytogenes é um patógeno humano veiculado por alimentos que causa transtornos entéricos em humanos e animais, provocando uma infecção conhecida como listeriose que pode evoluir para casos graves, como meningite ou septicemia, muitas vezes levando a morte, pacientes imunocomprometidos. Noventa e seis cepas de L. monocytogenes, de diversos sorogrupos, procedentes do Departamento de Bacteriologia, Laboratório de Zoonozes Bacterianas, do Instituto Oswaldo Cruz, FIOCRUZ, Rio de Janeiro, isoladas de alimentos e humano de diversas regiões brasileiras, foram analisadas com a técnica de PCR, utilizando primers específicos do gênero Listeria, direcionados ao gene rDNA 23S, específicos da espécie L. monocytogenes, direcionados ao gene hly da listeriolisina O e pesquisada a presença do gene inlA e inlC, da internalina, uma proteína de superfície celular responsável pela entrada da bactéria em células não fagocitárias do hospedeiro. Foi também realizada uma tipagem molecular utilizando a técnica de Ribotipagem-PCR. Todas as cepas analisadas apresentaram a amplificação dos fragmentos dos tamanhos esperados, 239 pb, 706 pb e 250 pb respectivamente para os genes ribossomal, hly e inlA. As cinqüentas cepas de Listeria foram agrupadas em quatro perfis de ribotipos, sendo um (R1) mais freqüente e distribuído por todos os sorogrupos, 1a, 1b, 1c e 4b. A presença dos genes da internalina e listeriolisina O sugere que as cepas têm potencial patogênico apesar dos achados obtidos com as técnicas moleculares não permitirem fazer qualquer associação com sorogrupos, perfil de ribotipo, fonte ou ano de isolamento.
Publicado ou submetido? não Situação: Em execução
Palavras-chave: 1: RIBOTIPAGEM 2: LISTERIOLISINA O 3: INTERNALINA Título do projeto do orientador: Padronização de métodos de diagnostico e tipagem de vibrio cholerae e de outras bactérias de interesse regional.
Programa/projeto: CNPq - FIOCRUZ/PIBIC Apoio financeiro: CNPq Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Genética 2.02.00.00-5 Sub-Área: Genética Molecular e de Microorganismos 2.02.02.00-8 Especialidade:
cSNPer, um programa para a identificação de possíveis polimorfismos de base única (SNPS) em etiquetas de seqüências expressas (ESTs).
Bolsista: Kleider Torres de Camargos Nome em cit. bibliográficas: TORRES, Kleider Orientador(a): Guilherme Correa de Oliveira Nome em cit. bibliográficas: OLIVEIRA, Guilherme C. Coorientador(a): Nome em cit. bibliográficas: E-mail: kleider@ufmg.br Unidade: CPqRR Departamento: Lab. de Parasitologia Celular e Molecular Lab. / Núcleo: Parasitologia Celular e Molecular Evento: XIII Reunião Anual de Iniciação Científica
Resumo:
Marcadores moleculares polimórficos são extremamente úteis para estudos de estrutura genética, ligação e montagem de genomas. Polimorfismos de base única, SNPs, são o tipo mais comum de variação de seqüência, são estáveis, dialélicos e fáceis de serem determinados experimentalmente. Existem alguns programas disponíveis para a identificação de SNPs em seqüências, mas alguns não têm uma descrição metodológica clara, outros são disponíveis apenas comercialmente e muitos não utilizam a informação de qualidade da seqüência obtida. Assim, fizemos o desenvolvimento do programa cSNPer que utiliza de uma metodologia clara para a identificação de SNPs com base na informação de qualidade das seqüências utilizadas. O programa foi projetado para a identificação de possíveis SNPs em seqüências agrupadas utilizando o parâmetro de NQS (qualidade da vizinhança de seqüências). O programa foi estruturado para alocar a memória dinâmicamente em variáveis enquanto era executado. O cSNPer analisa o resultado do agrupamento de seqüências no formato ACE gerado por programas como Phrap ou CAP3 como entrada. As seguintes regras são aplicadas para a detecção de SNPs. Para cada posição na seqüência consenso, se existirem pelo menos duas bases distintas nas seqüências agrupadas, o SNP é considerado apenas se: as duas bases são de qualidade bastante elevada (Phred e" 40), as bases da vizinhança tiverem qualidade alta (Phred e" 15) e no alinhamento, +/- 10 bases do possível SNP, não houver mais de 1 discrepância (substituição ou deleção/inserção). Cada substituição é anotada como sendo transição (substituição entre purinas) ou transversão (substituição ente pirimidinas). O cSNPer analisa também as mudanças de aminoácido. Substituições de aminoácidos codificados em posições de SNPs são classificadas como sinônimas (não há troca de aminoácido) ou não sinônimas (há troca de aminoácidos). O programa foi extensivamente testado seqüências artificiais e ESTs de Schistosoma mansoni.
Publicado ou submetido? não Situação: Em execução
Palavras-chave: 1: bioinformática 2: biologia 3: matemática computacional Título do projeto do orientador: Bioinformática no estudo do genoma do Schistosoma mansoni e outros parasitas
Programa/projeto: CNPq - FIOCRUZ/PIBIC Apoio financeiro: NIH-Fogarty, CNPq,FIOCRUZ Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Genética 2.02.00.00-5 Sub-Área: Genética Molecular e de Microorganismos 2.02.02.00-8 Especialidade: Identificação e caracterização de minicírculos de Trypanosoma vivax (Zieman, 1905) através de análise de GSS (Genome Sequence Survey) Aluno: Luana Tatiana Albuquerque Guerreiro Nome em cit. bibliográficas: GUERREIRO, Luana T. A. Vínculo Institucional: Aluna Tipo de Bolsa: FIOCRUZ E-mail: lutati@fiocruz.br Curso: Doutorado em Biologia Celular e Molecular Ano de Ingresso: Ano Orientador(a): Alberto Martin Rivera Dávila Nome em cit. bibliográficas: DÁVILA, Alberto M. R. Segundo(a) orientador(a): Nome em cit. bibliográficas: Pesquisador(a) Colaborador(a): Nome em citações bibliográficas: Área de Concentração: Evento: IX Jornada Científica da Pós-Graduação
Resumo:
Trypanosoma vivax é um hemoparasita causador de doença em ruminantes, amplamente distribuído na África, principalmente nas áreas onde a mosca tsé-tsé é encontrada. Também encontrado em vários países da América do Sul, principalmente no Pantanal-MT e na Bolívia. O T. vivax é um parasita patogênico considerado de grande importância para regiões agropecuárias da África e América do Sul. Estimam-se possíveis perdas econômicas de 160 milhões de dólares no Pantanal brasileiro e áreas inundáveis da Bolívia. Apesar da grande relevância econômica da doença causada por T. vivax, poucas pesquisas sobre sua caracterização foram realizadas até agora, comparado com tripanosomas que afetam a saúde humana como o T. brucei e T. cruzi. O diagnóstico das infecções por T. vivax continua sendo um desafio em função da baixa parasitemia observada na maioria das infecções, reforçando a importância da descoberta de novos marcadores para o desenvolvimento de ensaios mais sensíveis e espécie-específicos para o diagnóstico da infecção pelo T. vivax. Com o objetivo de gerar novos dados do genoma de T. vivax alçamos mão da geração e análise de GSS como estratégia de descobertas de genes, focando especificamente na identificação de minicírculos. A partir de uma biblioteca semi-normalizada, foram obtidas 455 GSS de alta qualidade, equivalentes a 0,5% do genoma do parasita, que foi estimado ser em torno de 25 MB. Destas, foram obtidas 331 GSS-nr, das quais 108 seqüências tiveram uma similaridade significante com seqüências depositadas nos bancos de dados públicos, sendo classificadas em três categorias funcionais do GO: processo biológico, componente celular e função molecular, e 18 seqüências não apresentaram nenhuma similaridade com os bancos de dados utilizados neste estudo, sendo consideradas genes órfãos. No presente estudo, iniciadores foram desenhados para obtenção das seqüências de minicírculo de diferentes cepas de T. vivax, e testados quanto a sua sensibilidade. Durante todo o trabalho foram identificados 36 minicírculos, cada um apresentando apenas uma região conservada e os blocos de seqüência conservada (CSB), estimando-se o tamanho do minicírculo em torno de 480 pb. Palavras-chave: 1: Trypanosoma vivax 2: Minicírculo 3: GSS Apoio financeiro: 1: Fiocruz 2: 3:
Está inserido no PAPES 3? Não
Está inserido no PDTIS? Não
Está inserido no PDTSP? Não
Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Genética 2.02.00.00-5 Sub-Área: Genética Molecular e de Microorganismos 2.02.02.00-8 Especialidade:
PCR-MULTIPLEX PARA A PESQUISA DE MICROSSATÉLITES EM DNA DE OVOS DE Schistosoma mansoni.
Bolsista: Maíra Mazzoni Pucci Nome em cit. bibliográficas: PUCCI, Maíra M. Orientador(a): Álvaro José Romanha Nome em cit. bibliográficas: ROMANHA, Álvaro J. Coorientador(a): Nilton Barnabé Rodrigues Nome em cit. bibliográficas: RODRIGUES, Nilton B. E-mail: mairap@cpqrr.fiocruz.br Unidade: CPqRR Departamento: Parasitologia Celular e Molecular Lab. / Núcleo: Parasitologia Celular e Molecular Evento: XIII Reunião Anual de Iniciação Científica
Resumo:
A esquistossomose é uma doença parasitária causada, no Brasil, exclusivamente, pelo verme trematódeo Schistosoma mansoni. Sua apresentação clínica varia de assintomática a sintomática grave. A severidade da doença tem sido atribuída a fatores genéticos e ambientais relacionados ao homem e ao parasito. Assim, um maior conhecimento da genética do parasito auxiliaria em muito no entendimento da doença. O objetivo deste trabalho é padronizar a PCR-multiplex, para loci de microssatélites em DNA de ovos de S. mansoni coletados de fezes de pacientes com esquistossomose. Microssatélites são segmentos de DNA de até 6 pares de bases, repetidos em tandem, altamente polimórficos, devido a variações no numero de repetições, dispersos pelo genoma e por isso utilizados como marcadores genéticos. Na PCR-multiplex amplificamos mais de um loci em uma única reação usando pares de iniciadores que gerem produtos de PCR de tamanhos diferentes. De 3.000 seqüências de DNA de S. mansoni com loci de microssatélites, forma desenhados iniciadores para 32 loci. Estes 32 loci foram divididos em 8 grupos com 4 loci em cada. Até o momento, através de variações nas concentrações de reagentes, nas temperaturas e no numero de ciclos nas reações, otimizamos a PCR-multiplex para 2 grupos de loci. Nestas reações usamos DNA extraído de ovos coletados em fezes de 2 pacientes, sendo 10 amostras de cada. O numero de alelos por locus variou de 1 a 12. A PCR-multiplex, aliada ao uso de ovos como fonte de DNA, tem se mostrado eficiente na pesquisa de microssatélites em estudos de genética de populações de S. mansoni, alem de minimizar os custos e o tempo gasto para a realização dos experimentos.
Publicado ou submetido? não Situação: Em execução
Palavras-chave: 1: PCR-multiplex 2: microssatélites 3: Schistosoma mansoni, DNA de ovos Título do projeto do orientador: Uso de microssatélites em estudos de genética de populações de Schistosoma mansoni em áreas endêmicas
Programa/projeto: CNPq - FIOCRUZ/PIBIC Apoio financeiro: CNPq - FIOCRUZ/PIBIC, WHO, FAPEMIG Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Genética 2.02.00.00-5 Sub-Área: Genética Molecular e de Microorganismos 2.02.02.00-8 Especialidade: Uso do Entecavir em pacientes Resistentes à Lamivudina Aluno: Marcelle Bottecchia Nome em cit. bibliográficas: BOTTECCHIA, Marcelle Vínculo Institucional: FIOCRUZ Tipo de Bolsa: Outra E-mail: mbottecchia@ioc.fiocruz.br Curso: Doutorado em Biologia Celular e Molecular Ano de Ingresso: 2003 Orientador(a): Selma de Andrade Gomes Nome em cit. bibliográficas: GOMES, Selma A. Segundo(a) orientador(a): Nome em cit. bibliográficas: Pesquisador(a) Colaborador(a): Nome em citações bibliográficas: Área de Concentração: Virologia Evento: IX Jornada Científica da Pós-Graduação
Resumo:
Introdução:
A infecção pelo vírus da Hepatite B (HBV) ainda é um sério problema de saúde para aproximadamente 5% da população mundial, mesmo com a disponibilidade da vacina. As opções de tratamento são limitadas e nenhuma delas obteve 100% de sucesso. As drogasmais utilizadas no tratamento do HBV são os análogos de nucleosídeo. Dessas duas jáforam aprovadas pelo FDA, lamivudina e adefovir dipivoxil, ambas bem toleradas, com respostas rápidas e efetivas,mas o uso prolongado por mais de um ano causa resistência viral.
O desenvolvimento de resistência à lamivudina é aproximadamente 10 vezes mais freqüente do que o referente ao adefovir dipivoxil (aproximadamente 60 e 6% respectivamente) durante os três primeiros anos de terapia. Entecavir, é um análogo de deoxiguanosina que tem uma potente atividade contra a linhagem HBV resistente tanto à lamivudina quanto ao adefovir dipivoxil. Seus estudos estão em fase III.
Metodologia:
Seis pacientes cronicamente infectados pelo vírus HBV e co-infectados pelo HIV estão participando deste estudo. Todos os pacientes foram tratados previamente com lamivudina por pelo menos três anos e apresentam sinais clínicos de resistência à lamivudina, incluindo altos níveis de transaminases (ALT) e altas níveis de HBV (> 107 copies/mL).
Todos os seis pacientes estão submetidos ao tratamento com entecavir a três meses e a cada mês de tratamento foram coletadas amostras de sangue para acompanhamento. O DNA do vírus HBV foi extraído de todas as amostras de soro e posteriormente seqüenciado para a região pré-S/S.
Resultados:
Estudos anteriores com esses mesmos pacientes foi observada uma dupla mutação bem caracterizada de resistência à lamivudina (L526M, M550V) no gene da polimerase. A normalização dos níveis de ALT também foi observada na maioria dos pacientes assim como uma diminuição na carga viral foi observada em somente um único paciente.
Análise filogenética mostrou que todos os isolados desses pacientes pertencem ao subgenótipo A (genótipo A). Conclusão: Um acompanhamento maior desses pacientes é necessário para que possamos avaliar a eficácia do entecavir em pacientes resistentes à lamivudina.
Palavras-chave: 1: Hepatite B 2: Resistencia a lamivudina 3: Entecavir Apoio financeiro: 1: Fiocruz 2: 3:
Está inserido no PAPES 3? Não
Está inserido no PDTIS? Não
Está inserido no PDTSP? Não
Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Genética 2.02.00.00-5 Sub-Área: Genética Molecular e de Microorganismos 2.02.02.00-8 Especialidade: Caracterização imunológica de antígenos recombinantes de Leishmania chagasi selecionados por immunoscreening de biblioteca de cDNA Aluno: Marcia Almeida de Melo Nome em cit. bibliográficas: MELO, Marcia A. Vínculo Institucional: Universidade Federal de Campina Grande Tipo de Bolsa: CAPES E-mail: almeidamelo@yahoo.com.br Curso: Doutorado em Biologia Parasitária Ano de Ingresso: 2002 Orientador(a): Paulo Paes de Andrade Nome em cit. bibliográficas: ANDRADE, Paulo P. Segundo(a) orientador(a): Nome em cit. bibliográficas: Pesquisador(a) Colaborador(a): Nome em citações bibliográficas: Área de Concentração: Genética Molecular e de Microorganismos Evento: IX Jornada Científica da Pós-Graduação
Resumo:
A Leishmaniose visceral, é uma doença crônica e freqüentemente fatal para o homem e o cão. Nas Américas, tem como agente etiológico a espécie Leishmania (L) chagasi. No modelo murino, durante a infecção por L. major, a resposta imune tipo T helper 1 (Th1), com produção de Interferon- (IFN-³), é associada à resistência à doença; enquanto que a suscetibilidade é mediada por linfócitos Th2, com marcada hipergamaglobulinemia e com altos níveis de IL-4, IL-5 e IL-10. Para a leishmaniose visceral, contudo, a dicotomia entre Th1/Th2 não é tão clara no modelo murino. Por outro lado, a resposta imune no modelo canino parece seguir, ao menos na maior parte, o modelo murino com altos níveis de IL-2 e fator de necrose tumoral alfa (TNF-±), sugerindo um papel dessas citocinas na resistência à L. infantum. O advento da genômica tem trazido uma enorme quantidade de novas informações para a parasitologia, que contribui para acelerar a descoberta de genes envolvidos em vias metabólicas exclusivas, na patogenicidade e na compreensão dos mecanismos pelos quais o parasita evade a resposta humana. Em 2000, foi criado o Programa Genoma Nordeste (ProGeNE) na qual a primeira proposta foi o estudo do transcriptoma da L. chagasi. A construção da biblioteca de cDNA disponibilizou um grande número de genes representando proteínas exclusivas de Leishmania abrindo caminho para a exploração do potencial antigênico numa abordagem que associa a análise bioinformática com o estudo in vitro e in vivo da antigenicidade e imunogenicidade das proteínas. Desta forma, o objetivo deste projeto é selecionar proteínas antigênicas, exclusivas de tripanosomatídeos, da biblioteca de cDNA do ProGeNE, utilizando soros de humanos e cães infectados, que podem ser promissoras para vacinas ou teste de diagnóstico. Quanto aos impactos esperados, o painel de antígenos possibilitará uma gama de novas pesquisas de antigenicidade e imunogenicidade nos modelos murino e canino, contribuindo para o desenvolvimento de vacinas efetivas e diagnósticos mais sensíveis e específicos para a leishmaniose visceral canina e humana.
Palavras-chave: 1: Leishmania chagasi 2: biblioteca de cDNA 3: immunoscreening Apoio financeiro: 1: CNPq 2: FACEPE 3:
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Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Genética 2.02.00.00-5 Sub-Área: Genética Molecular e de Microorganismos 2.02.02.00-8 Especialidade:
SUBCLONAGEM E EXPRESSÃO EM Escherichia coli DE GENES QUE CODIFICAM PARA ANTÍGENOS IMUNOLOGICAMENTE RELEVANTES DE Leishmania (Leishmania) chagasi.
Bolsista: Marília Barbosa do Nascimento Nome em cit. bibliográficas: NASCIMENTO, Marília B. Orientador(a): Osvaldo Pompílio de Melo Neto Nome em cit. bibliográficas: MELO-NETO, Osvaldo P. Coorientador(a): Rodrigo Menezes de Campos Nome em cit. bibliográficas: CAMPOS, Rodrigo M. E-mail: nascimento_marilia@hotmail.com Unidade: CPqAM Departamento: Microbiologia Lab. / Núcleo: Microbiologia Evento: XIII Reunião Anual de Iniciação Científica
Resumo:
A Leishmaniose é uma importante doença infecciosa parasitária, endêmicas em países tropicais e subtropicais, e com alta incidência mundial. Essa doença apresenta distintos quadros clínicos bastante debilitantes que podem evoluir até mesmo para a morte, se não diagnosticados ou erroneamente diagnosticados. A enfermidade é classificada nos tipos tegumentar ou visceral, sendo causada por protozoários do gênero Leishmania transmitidos por insetos dípteros da família Flebotominae. O protozoário é capaz de infectar vários hospedeiros mamíferos, dependendo da espécie do parasita e da resposta imune do hospedeiro. No Brasil, a Leishmaniose visceral é causada pela espécie L. chagasi, enquanto que uma das principais causadoras da leishmaniose tegumentar é a L. brasiliensis. Esse projeto se enquadra dentro de uma proposta de caracterizar novos genes e moléculas antigênicas de L. chagasi, com potencial para serem usados no melhoramento das técnicas para diagnóstico e no desenvolvimento da vacina contra Leishmaniose visceral. Em uma etapa preliminar, através de colaboração com pesquisadores do CPqGM, genes distintos que codificam moléculas antigênicas foram selecionadas por rastreamento de bibliotecas de expressão de L. chagasi com soros de animais e pacientes acometidos de leishmaniose visceral. Vários desses genes identificados foram selecionados, submetidos a seqüenciamento automático e as respectivas seqüências de nucleotídeos analisadas em bancos de seqüências genômicas de L. infantum e L. major. Neste trabalho, duas das seqüências identificadas como relevantes foram selecionadas para se iniciar sua caracterização e confirmar sua imunogenicidade. A caracterização das seqüências selecionadas se realizará a partir da subclonagem dos genes em plasmídios da série pRSET. Assim, as respectivas proteínas recombinantes serão fusionadas a uma seqüência de poli-histidinas nas suas extremidades amino-terminal, expressas em bactérias Escherichia coli para, em seguida, serem purificadas por cromatografia de afinidade e utilizadas na imunização de coelhos para produção de soros policlonal específicos. Estes soros serão futuramente usados na caracterização funcional dessas proteínas.
Publicado ou submetido? não Situação: Em execução
Palavras-chave: 1: Antígenos 2: Diagnóstico 3: Leishmania Título do projeto do orientador: IDENTIFICAÇÃO E CARACTERIZAÇÃO DE NOVOS ANTÍGENOS COM POTENCIAL PARA INDUÇÃO DE IMUNIDADE PROTETORA CONTRA AS LEISHMANIOSES TEGUMENTAR E VISCERAL.
Programa/projeto: CNPq - FIOCRUZ/PIBIC Apoio financeiro: PIBIC/CNPq/FACEPE Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Genética 2.02.00.00-5 Sub-Área: Genética Molecular e de Microorganismos 2.02.02.00-8 Especialidade:
SEQUENCIAMENTO DO PLASMÍDEO pYV DE UMA CEPA DE Yersinia pestis (P. EXU 340) DO FOCO DA CHAPADA DO ARARIPE/PE
Bolsista: Mirele Regina de Araújo Nome em cit. bibliográficas: ARAÚJO, Mirele R. Orientador(a): Alzira Maria Paiva de Almeida Nome em cit. bibliográficas: ALMEIDA, Alzira M. P. Coorientador(a): Maria Betânia Melo de Oliveira Nome em cit. bibliográficas: OLIVEIRA, Maria B. M. E-mail: mireleregina@gmail.com Unidade: CPqAM Departamento: Microbiologia Lab. / Núcleo: Microbiologia Evento: XIII Reunião Anual de Iniciação Científica
Resumo:
A Yersinia pestis é o agente causador da peste, doença primária dos roedores, geralmente transmitida pelas pulgas que pode ocasionalmente infectar o homem e outros mamíferos. O objetivo deste projeto é a obtenção de maior conhecimento das características das cepas brasileiras. Uma das abordagens foi o seqüenciamento do plasmídeo pYV da cultura YP 340TC (pFra- pPst- pYV+) derivada da cepa Y. pestis P. Exu 340. Foram realizadas extrações de DNA plasmidial em larga escala a partir de 1 L de cultura crescida a 28oC por 48h. As técnicas utilizadas para purificação do DNA obtido (Kit Plasmid Max 25 e Polietileno Glicol/PEG) não se mostraram eficientes para eliminação do DNA cromossômico. Outras técnicas deverão ser utilizadas para se obter DNA puro necessário para o seqüenciamento. Outra abordagem empregada foi à análise dos múltiplos locos do número variável de repetições em tandem (MLVA) utilizando três pares de primers (1AB, 2AB e 5AB) para amplificação de seqüências que flanqueiam regiões repetitivas ou VNTR do genoma das yersínias. Um total de 43 cepas de Y. pestis (originadas de diferentes fontes nos diversos focos e diferentes períodos), nove de Y. enterocolitica e cinco de Y. pseudotuberculosis foram estudadas. As análises com o primer 1AB produziram amplificações apenas nas cepas de Y. pestis e Y. pseudotuberculosis. Com os primers 2AB e 5AB houve amplificação em todas as cepas analisadas. Os amplicons obtidos com os primers 1AB e 5AB nas cepas de Y. pestis foram bastante monomórficos quanto ao número e o tamanho dos segmentos amplificados, gerando apenas segmentos de 270 pb e 300 pb, respectivamente. As amplificações com o primer 2AB geraram um padrão de amplificação polimórfico (bandas de 250 a 700 pb) nas cepas estudadas, o que permitiu distribuí-las em cinco perfis genotípicos diferentes. A técnica MLVA utilizando o primer 2AB deverá ser aplicada em maior número de cepas para análise dos resultados em associação aos dados epidemiológicos.
Publicado ou submetido? não Situação: Em execução
Palavras-chave: 1: Yersinia pestis 2: MLVA 3: pYV Título do projeto do orientador: AVALIAÇÃO DA DIVERSIDADE EM CEPAS BRASILEIRAS DE Yersinia pestis PARA DESENVOLVIMENTO DE NOVA GERAÇÃO DE TESTES DE DIAGNÓSTICO.
Programa/projeto: CNPq - FIOCRUZ/PIBIC Apoio financeiro: PAPES III, CNPq Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Genética 2.02.00.00-5 Sub-Área: Genética Molecular e de Microorganismos 2.02.02.00-8 Especialidade: Uso de microssatélites em estudos de genética de populações de Schistosoma mansoni em áreas endêmicas Aluno: Nilton Barnabé Rodrigues Nome em cit. bibliográficas: RODRIGUES, Nilton B. Vínculo Institucional: Tipo de Bolsa: Outra E-mail: barnabe@cpqrr.fiocruz.br Curso: Doutorado em Ciências da Saúde Ano de Ingresso: 2003 Orientador(a): Álvaro José Romanha Nome em cit. bibliográficas: ROMANHA, Álvaro J. Segundo(a) orientador(a): Guilherme Corrêa Oliveira Nome em cit. bibliográficas: OLIVEIRA, Guilherme C. Pesquisador(a) Colaborador(a): Nome em citações bibliográficas: Área de Concentração: Biologia Celular e Molecular Evento: IX Jornada Científica da Pós-Graduação
Resumo:
Microssatélites são hoje os marcadores de escolha para estudos de genética de populações, entretanto, pouco já foi descrito sobre seu uso em Schistosoma mansoni especialmente em estudos de campo deste parasito. Nosso objetivo é descrever a estrutura genética de populações de S. mansoni em áreas endêmicas para esta parasitose. Para atingir este objetivo desenvolvemos marcadores de microssatélites para S. mansoni; coletamos amostras de fezes de pacientes de áreas endêmicas; desenvolvemos um método para extrair DNA de ovos coletados em fezes e amplificá-lo por PCR. De um total de 380 seqüências de DNA genômico de S. mansoni identificadas em 4 diferentes bibliotecas enriquecidas para microssatélites, selecionamos e desenhamos iniciadores para PCR-multiplex para 32 loci. Na PCR-multiplex amplificamos mais de um locus em uma única reação, usando pares de iniciadores que geraram produtos de PCR de tamanhos diferentes. Coletamos amostras de pacientes de 9 áreas endêmicas, 5 em Minas Gerais. Em três das áreas de Minas, Virgem das Graças (VDG), Palha Geral (PG) e Córrego do Onça (CO), coletamos amostras de fezes, um ano antes e dois anos pós-tratamento dos pacientes com Praziquantel. Foram amostrados 114 pacientes em VDG, 38 em PG e 20 em CO. Os ovos foram separados, um a um e mantidos a -70oC. O uso de DNA derivado de ovos permite a investigação direta, de populações do parasito não submetidas às condições de laboratório. Numa primeira etapa, 80 ovos, 10 por paciente foram genotipados em 4 loci. O número de alelos por locus variou de 1 a 9, sem diferenças entre os pacientes. Observamos desvios do equilíbrio de Hardy-Weinberg para todos os loci nas populações de todos os pacientes. A heterozigozidade observada (0,20 a 0,75) foi sempre menor que a esperada, possivelmente indicando inbreeding ou efeito fundador. O número de diferentes haplótipos variou de 8 a 18 entre as populações. Estes dados podem indicar uma possível estruturação genética das populações de parasitos em áreas endêmicas. Palavras-chave: 1: Microssatélites 2: Schistosoma mansoni 3: Genética de populações Apoio financeiro: 1: OMS-TDR 2: FAPEMIG 3:
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Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Genética 2.02.00.00-5 Sub-Área: Genética Molecular e de Microorganismos 2.02.02.00-8 Especialidade:
Avaliação da importância epidemiológica da variabilidade genética observada em populações naturais de Leishmania (Viannia) sp. circulando em áreas endêmicas de LTA.
Bolsista: Paula Pezzuto Nome em cit. bibliográficas: PEZZUTO, Paula Orientador(a): Elisa Cupolillo Nome em cit. bibliográficas: CUPOLILLO, Elisa Coorientador(a): Gabriel Grimaldi Jr Nome em cit. bibliográficas: GRIMALDI-JÚNIOR, Gabriel E-mail: paula_rj3007@yahoo.com.br Unidade: IOC Departamento: Imunologia Lab. / Núcleo: Pesquisas em Leishmaniose Evento: XIII Reunião Anual de Iniciação Científica
Resumo:
Os parasitas do gênero Leishmania (Kinetoplastida:Trypanosomatidae) formam um grupo de microorganismos bastante heterogêneo, que apresentam a capacidade de infectar diversas ordens de mamíferos, inclusive o homem. Estes parasitas são agentes etiológicos das leishmanioses, doença endêmica em regiões tropicais e subtropicais e que apresenta ampla distribuição geográfica no Mundo. A alta homologia entre as espécies de Leishmania e o fato de que estas ocorrem comumente em simpatria provavelmente reflete a diversidade genética encontrada nestes grupo de parasitas. Em áreas endêmicas de LTA em Pernambuco a L. braziliensis tem sido incriminada como o agente etiológico da doença e um alto polimorfismo genético tem sido observado nas populações naturais dos parasitas estudados. No entanto, resultados preliminares mostram que (i) L. (V.) shawi também participa como patógeno da LTA humana nesta área, embora com baixa frequência e (ii) que as variantes genéticas observadas parecem corresponder a combinação de alelos entre as duas espécies mencionadas acima. No presente projeto pretendemos analisar isolados de Leishmania provenientes de área endêmica de LTA em Pernambuco, obtidos no período de 1996 a 2004, caracterizando estes por MLEE, empregando 18 sistemas gene-enzimáticos. As variantes genéticas determinadas serão avaliadas por PCR direcionadas para os loci onde foram detectadas variações Multi locus sequencing typing - MLST. Além disso, considerando que as variantes enzimáticas ocorrem em frequências distintas e que estas variantes interagem biologicamente uma sobre as outras, avaliações biológicas destas variantes serão conduzidas, através da avaliação da curva de crescimento, do desenvolvimento em macrófagos e da influência que as diferentes cepas têm umas sobre as outras com relação ao crescimento in vitro, quando estas são co-cultivadas, e no desenvolvimento in vivo em modelos experimentais murinos.
Publicado ou submetido? não Situação: Em execução
Palavras-chave: 1: Epidemiologia 2: Variabilidade 3: Leishmania Título do projeto do orientador: Avaliação da importância epidemiológica da variabilidade genética observada em populações naturais de Leishmania (Viannia) sp. circulando em áreas endêmicas de LTA.
Programa/projeto: CNPq - FAPEAM / PIBIC Apoio financeiro: 241,00 Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Genética 2.02.00.00-5 Sub-Área: Genética Molecular e de Microorganismos 2.02.02.00-8 Especialidade: Genética molecular e evolução de genes que controlam o comportamento em mosquitos: Genética de populações do gene timeless em Anopheles darlingi. Aluno: Rachel Canto Bottino Nome em cit. bibliográficas: CANTO, Rachel B. Vínculo Institucional: bolsista Tipo de Bolsa: CAPES E-mail: rachelcanto@uol.com.br Curso: Mestrado em Biologia Parasitária Ano de Ingresso: 2005 Orientador(a): Alexandre Afrânio Peixoto Nome em cit. bibliográficas: PEIXOTO, Alexandre A. Segundo(a) orientador(a): Nome em cit. bibliográficas: Pesquisador(a) Colaborador(a): Paulo Ribolla; Denise Valle; José Bento Lima Nome em citações bibliográficas: RIBOLLA, Paulo ; VALLE, Denise ; LIMA, José B. Área de Concentração: Genética de populações de vetores Evento: IX Jornada Científica da Pós-Graduação
Resumo:
Os mosquitos do gênero Anopheles vêm sendo bastante investigados devido ao seu alto potencial de transmissão de malária e a espécie Anopheles darlingi (Diptera: Culicidae), pertencente ao subgênero Nyssorhyncus, é o principal vetor desta doença no Brasil. Os mosquitos desta espécie são freqüentemente encontrados infectados pelas formas esporozoítas do Plasmodium causador da malária e apresentam comportamento, em geral, altamente antropofílico. Os ritmos de atividade e alimentação de insetos vetores são controlados por um relógio biológico interno do qual alguns genes já foram identificados e seqüenciados em Drosophila, sendo um deles o gene timeless. Este gene apresenta influência decisiva no controle dos ritmos de atividade do organismo, podendo estar envolvido na regulação de características do comportamento que variam entre espécies, como os ritmos de alimentação, e também os ritmos de acasalamento, exercendo, possivelmente, um importante papel no processo de especiação. Sendo assim, este gene é um excelente marcador molecular para a investigação de complexos de espécies de mosquitos. Uma das características marcantes de An. darlingi é sua variação no padrão de comportamento entre diferentes populações, como o horário de preferência para realização do repasto sangüíneo, tendo sido levantada a hipótese de tratar-se este anofelino de um complexo de espécies crípticas. Neste projeto, pretendemos realizar um estudo da genética de populações de An. darlingi usando o gene timeless como marcador molecular. Inicialmente, clonamos e seqüenciamos um fragmento de aproximadamente 450 pares de base deste gene utilizando a técnica de PCR com oligonucleotídeos degenerados. A partir deste primeiro fragmento, oligos específicos foram desenhados e estão sendo usados, no momento, no estudo de uma população de An. darlingi de Rondônia. Posteriormente, esta análise será estendida a outras localidades no Brasil.
Palavras-chave: 1: Anopheles darlingi 2: timeless 3: complexo de espécies Apoio financeiro: 1: CAPES 2: Fiocruz 3: HHMI
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Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Genética 2.02.00.00-5 Sub-Área: Genética Molecular e de Microorganismos 2.02.02.00-8 Especialidade:
Determinantes Genéticos da Resistência em Klebsiella pneumoniae
Bolsista: Rafaela Carrilho Lima Batista Nome em cit. bibliográficas: BATISTA, Rafaela C. L. Orientador(a): Ana Carolina Paulo Vicente Nome em cit. bibliográficas: VICENTE, Ana C. P. Coorientador(a): Érica Lourenço da Fonseca Nome em cit. bibliográficas: FONSECA, Érica L. E-mail: radicool@globo.com Unidade: IOC Departamento: Genética Lab. / Núcleo: Laboratório de Genética Molecular de Microrganismos Evento: XIII Reunião Anual de Iniciação Científica
Resumo:
Klebsiella pneumoniae é um bacilo Gram negativo da família Enterobacteriaceae, associada a infecções nosocomiais. É crescente o número de isolados apresentando resistência a múltiplos antibióticos. Esta resistência pode ser conseqüência de distintos mecanismos, entre eles a produção de enzimas codificadas por genes adquiridos horizontalmente. Dentre elas encontram-se as b-lactamases que determinam a resistência aos b-lactâmicos. As b-lactamases de classe A (ESBLs) são de grande relevância por conferir um amplo espectro de resistência a b-lactâmicos de terceira e quarta geração. Os integrons são elementos genéticos importantes na disseminação, aquisição e expressão da resistência. Dentre eles os de classe 1 têm sido os mais estudados, apresentando uma ampla distribuição entre as bactérias e normalmente carreando genes de resistência aos antibióticos. O objetivo desse trabalho foi avaliar a presença, em K. pneumoniae, de elementos genéticos e genes associados à resistência a antimicrobianos. Foram utilizados 20 isolados de hospitais de São Luiz do Maranhão no período de maio a dezembro de 2000, na qual realizou-se a identificação e caracterização dos genes blaGES, blaOXA, blaTEM, blaSHV, blaSPM, blaIMP, e pesquisa das três classes de integron por PCR. As amostras positivas para o gene IntI1 foram submetidas à análise por PCR da presença de cassetes gênicos na região variável do integron. Como resultados, obtivemos a determinação da presença de integrons classe 1 em 7 amostras e a prevalência da b-lactamase blaTEM em 9 amostras. Não foi encontrado o gene blaSHV, blaSPM, blaIMP. Uma das amostras apresentou ambos blaOXA-1 e blaOXA-2, pertencentes à família OXA. A seqüência nucleotídica do amplicon correspondente ao gene blaTEM revelou a presença do alelo corresponde ao blaTEM-1. Nenhum dos genes identificados estavam associados a integrons. Pela primeira vez, determinou-se a presença dos genes blaTEM, blaOXA e blaGES em isolados de K. pneumoniae no Brasil .
Publicado ou submetido? não Situação: Em execução
Palavras-chave: 1: Genes de resistência a antimicrobianos 2: Integron 3: Klebsiella pneumoniae Título do projeto do orientador: Variabilidade Genética, Virulência e Resistência em Bactérias
Programa/projeto: CNPq - FIOCRUZ/PIBIC Apoio financeiro: POM IOC e CNPq Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Genética 2.02.00.00-5 Sub-Área: Genética Molecular e de Microorganismos 2.02.02.00-8 Especialidade: Caracterização molecular de antígenos de Leishmaia (Leishmania) chagasi potencialmente úteis no controle da leishmaniose visceral. Aluno: Rodrigo Menezes de Campos Nome em cit. bibliográficas: CAMPOS, Rodrigo M. Vínculo Institucional: Estudante de Mestrado Tipo de Bolsa: CNPq E-mail: m_canpos@yahoo.com.br Curso: CPqAM - Mestrado em Saúde Pública Ano de Ingresso: 2004 Orientador(a): Osvaldo Pompílio de Melo Neto Nome em cit. bibliográficas: NETO, Osvaldo P. M. Segundo(a) orientador(a): Nome em cit. bibliográficas: Pesquisador(a) Colaborador(a): Nome em citações bibliográficas: Área de Concentração: Genética molecular e de microorganismos Evento: IX Jornada Científica da Pós-Graduação
Resumo:
A leishmaniose é uma importante doença infecciosa com vasta distribuição mundial, destacando-se como grave problema de saúde pública. A doença possui diversas formas clínicas dependendo do estado imunológico do paciente e da espécie do parasita que o infectou, sendo classificada nos tipos tegumentar ou visceral. Ela tem como agentes causadores protozoários do gênero Leishmania, que são transmitidos por insetos do gênero Lutzomia ou Phlebotomus. Por ser uma importante causa de morbidade e mortalidade no cenário mundial, a leishmaniose necessita ser mais profundamente estudada ao nível da biologia dos agentes causadores. A adequada identificação e caracterização de genes desse parasita podem possibilitar o estudo de antígenos com potencial para serem utilizados no aperfeiçoamento das técnicas de diagnóstico, na imunoterapia e no desenvolvimento de vacina para o controle da doença. Este trabalho propõe caracterizar genes de L. chagasi que codificam proteínas antigênicas relevantes. Através de colaboração com pesquisadores do CPqGM, genes distintos que codificam moléculas antigênicas foram selecionados por rastreamento de bibliotecas de expressão de L. chagasi com soros de animais e humanos com leishmaniose visceral. Genes identificados como relevantes foram subclonados e clonados para expressarem as respectivas proteínas recombinantes através de plasmídios de expressão. Proteínas antigênicas identificadas como codificando homólogos a HSP70 mitocondrial de L. chagasi foram utilizadas para a imunização de animais de laboratório, permitindo a obtenção de soros policlonais específicos e o estudo da presença dessas moléculas antigênicas em diferentes fases do ciclo de vida do parasita. Outra família de proteínas foi selecionada e, após sequenciamento parcial e análise em banco de dados genômicos de L. infantum e L. major, foram identificadas como proteínas transmembrânicas. Com isso visamos aprofundar os estudos a cerca do parasita, contribuindo com o desenvolvimento de alternativas para o controle da leishmaniose visceral e beneficiando a saúde coletiva. Palavras-chave: 1: Leishmaniose 2: Antígenos 3: Diagnóstico Apoio financeiro: 1: CNPq 2: 3:
Está inserido no PAPES 3? Não
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Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Genética 2.02.00.00-5 Sub-Área: Genética Molecular e de Microorganismos 2.02.02.00-8 Especialidade:
Expressão em Escherichia coli de dois homólogos ao fator de iniciação da tradução eIF4G de Trypanosoma brucei para produção de soro policlonal em coelhos.
Bolsista: Rodrigo Pontes de Lima Nome em cit. bibliográficas: LIMA, Rodrigo P. Orientador(a): Osvaldo Pompílio de Melo Neto Nome em cit. bibliográficas: MELO-NETO, Osvaldo P. Coorientador(a): Tamara De'Carli da Costa Lima Nome em cit. bibliográficas: COSTA-LIMA, Tamara D. E-mail: rodrigoponteslima@hotmail.com Unidade: CPqAM Departamento: Microbiologia Lab. / Núcleo: Microbiologia Evento: XIII Reunião Anual de Iniciação Científica
Resumo:
Os tripanossomatídeos são agentes causadores de uma série de enfermidades de impacto mundial e destacam-se por apresentarem um conjunto de características não encontradas em outros eucariotos. Diferente dos demais, onde a regulação da expressão gênica é controlada em parte no processo de transcrição, esses eucariotos primitivos parecem ter uma importante regulação a nível pós-transcricional. Desta forma, acredita-se que a etapa de iniciação da síntese de proteínas, também conhecida por tradução, possa ter um papel fundamental no controle global da expressão gênica desses parasitas. O complexo de iniciação da tradução que media o reconhecimento do mRNA pelo ribossomo chama-se eIF4F. Este é composto por três subunidades: eIF4A, eIF4E e eIF4G. O complexo eIF4F se liga ao cap na região 5' do mRNA e se associa ainda com a proteína de ligação à cauda poli-A (PABP) presente na região 3', através da interação dessa proteína com a subunidade eIF4G. Este trabalho teve por objetivo inicial caracterizar um terceiro homólogo da PABP (LmPABP3) encontrado a partir de seqüências genômicas de L. major disponíveis em rede. Durante esta etapa, foram realizadas reações de PCR para estabelecer as melhores condições de amplificação do gene de 1640pb. Posteriormente, com a identificação de cinco seqüências homólogas ao fator eIF4G em banco de dados do genoma de L. major e T. brucei, e a caracterização preliminar delas, este trabalho mudou seu objetivo para contribuir na caracterização de dois dos homólogos identificados em T. brucei, denominados TbEIF4G3 e TbEIF4G4. Para isso, fragmentos dos respectivos genes, correspondentes às suas regiões mais conservadas, estão sendo subclonados no vetor plasmidial (pET21a), o que permitirá a expressão em Escherichia coli de proteínas recombinantes fusionadas a uma seqüência de histidinas. As proteínas recombinantes serão purificadas e utilizadas na produção de anticorpos policlonais em coelhos. Os soros obtidos serão testados quanto à sua capacidade de reconhecimento das proteínas recombinantes, através de ensaios de Western-blot. O uso desses anticorpos será de grande importância em etapas futuras da caracterização funcional desses homólogos.
Publicado ou submetido? não Situação: Em execução
Palavras-chave: 1: Síntese protéica 2: eIF4G 3: Tripanossomatídeos Título do projeto do orientador: Identificação e caracterização funcional de fatores protéicos envolvidos na iniciação da síntese de proteínas em tripanossomatídeos
Programa/projeto: CNPq - FIOCRUZ/PIBIC Apoio financeiro: PIBIC/CNPq/FACEPE Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Genética 2.02.00.00-5 Sub-Área: Genética Molecular e de Microorganismos 2.02.02.00-8 Especialidade: Uso da técnica de Reação em Cadeia de Polimerase (PCR) para detecção do genoma do Vírus da Imunodeficiência Felina (FIV) Aluno: Sheila de Oliveira Medeiros Nome em cit. bibliográficas: MEDEIROS, Sheila O. Vínculo Institucional: aluna Tipo de Bolsa: FIOCRUZ E-mail: smedeiros@ioc.fiocruz.br Curso: Mestrado em Biologia Celular e Molecular Ano de Ingresso: 2004 Orientador(a): Herman Gonçalves Shatzmayr Nome em cit. bibliográficas: SCHATZMAYR, Herman G. Segundo(a) orientador(a): Nome em cit. bibliográficas: Pesquisador(a) Colaborador(a): Tânia Maria Pacheco Schubach Nome em citações bibliográficas: SCHUBACH, Tânia M. P. Área de Concentração: Virologia Evento: IX Jornada Científica da Pós-Graduação
Resumo:
O vírus da imunodeficiência felina (FIV) é o agente etiológico da síndrome da imunodeficiência adquirida dos felinos (fAIDS), tendo sido descrito em 1987 por Neils Pedersen e colaboradores. FIV pertence à família Retroviridae, subfamília lentivirinae, e possui muitas similaridades com o vírus da imunodeficiência humana (HIV). Estudo epidemiológico realizado no Rio de Janeiro no ano 2000 demonstrou uma prevalência de 16,7% em população de felinos enfermos e contactantes.
O objetivo do projeto é avaliar a aplicabilidade da técnica de Reação em Cadeia de Polimerase (PCR) na detecção do DNA proviral do FIV em felinos domésticos infectados naturalmente.
Para a realização deste objetivo, amostras de sangue de felinos com sorologia para anti-FIV estão sendo analisadas pela técnica de Nested-PCR para duas regiões do genoma: gag e pol. Amostras de sangue de animais soronegativos estão sendo utilizadas como controle.
Até o momento, as amostras dos animais soropositivos que foram avaliadas amplificaram para as duas regiões do genoma do FIV, e as amostras soronegativas não amplificaram para as mesmas regiões.
Palavras-chave: 1: FIV 2: PCR 3: Felinos Apoio financeiro: 1: Fiocruz 2: 3:
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Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Genética 2.02.00.00-5 Sub-Área: Genética Molecular e de Microorganismos 2.02.02.00-8 Especialidade:
IDENTIFICAÇÃO E CARACTERIZAÇÃO FUNCIONAL PRELIMINAR DE HOMÓLOGOS À PROTEÍNA DE LIGAÇÃO A CAUDA POLI-A (PABP) EM Leishmania major.
Bolsista: Tamara De' Carli da Costa Lima Nome em cit. bibliográficas: COSTA-LIMA, Tamara D. C. Orientador(a): Osvaldo Pompílio de Melo Neto Nome em cit. bibliográficas: MELO-NETO, Osvaldo P. Coorientador(a): Christian Robson de Souza Reis Nome em cit. bibliográficas: REIS, Christian R. S. E-mail: tc@cpqam.fiocruz.br Unidade: CPqAM Departamento: Departamento de Microbiologia Lab. / Núcleo: Laboratório de Microbiologia Clínica e Molecular Evento: XIII Reunião Anual de Iniciação Científica
Resumo:
Em eucariotos, a iniciação da síntese protéica é uma das principais etapas necessárias a tradução dos mRNAs em proteínas e está associada a eventos de controle pós-transcricional da expressão gênica. Nesta etapa o reconhecimento do mRNA pelo ribossomo é mediado pelo complexo heterotrimérico de iniciação da tradução eIF4F, presente na extremidade 5dos mRNAs. Por sua vez o eIF4F interage com a PABP (de poly-A binding protein), que se liga a cauda poli-A dos mRNAs. A PABP é uma proteína bastante conservada que apresenta múltiplas funções relacionadas ao controle da tradução, estabilidade e no transporte núcleo/citoplasma dos mRNAs. Pouco se sabe sobre a PABP em tripanossomatídeos embora já tenham sido descritos homólogos em Leishmania major, Trypanosoma cruzi e T. brucei. Este trabalho teve por objetivo caracterizar dois homológos de PABP de L. major (LmPABP1-2), encontrados em seqüências derivadas do projeto genoma deste parasita. Os respectivos genes foram amplificados por PCR e clonados em vetores plasmidiais de expressão. Estas clonagens foram confirmadas por transcrição e tradução in vitro, onde observou-se a síntese de polipeptídeos compatíveis com o tamanho esperado de 57 e 63 kDa para as LmPABP1 e 2. As respectivas proteínas recombinantes foram então expressas em Escherichia coli fusionadas a seqüências de poli-histidinas ou a Glutationa S-transferase. As fusões com poli-histidinas foram purificadas e utilizadas na produção de soro policlonal em coelhos. A especificidade destes soros pelas proteínas recombinantes e o reconhecimento de bandas específicas em extratos da forma promastigota de L. major foram confirmadas através de reações de Western-Blot. Foi possível observar, para a LmPABP1, a presença de formas fosforilada e não fosforilada da proteína. Já para a LmPABP2 só foi observada uma única forma. Nestes ensaios foi possível ainda uma quantificação preliminar dos níveis intracelulares destas proteínas. Enquanto a LmPABP2, a mais abundante, foi detectada em níveis acima de 10 ng por 106 células, a LmPABP1 está presente numa concentração inferior a 5 ng por 106 células.
Publicado ou submetido? não Situação: Em execução
Palavras-chave: 1: síntese protéica 2: PABP 3: tripanossomatídeos Título do projeto do orientador: Identificação e caracterização funcional de fatores protéicos envolvidos na iniciação da síntese de proteínas em tripanossomatídeos.
Programa/projeto: CNPq - FIOCRUZ/PIBIC Apoio financeiro: PIBIC/CNPq/FACEPE Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Genética 2.02.00.00-5 Sub-Área: Genética Molecular e de Microorganismos 2.02.02.00-8 Especialidade:
PADRONIZAÇÃO DE TÉCNICAS DE EXTRAÇÃO DE DNA FÚNGICO DE AMOSTRAS AMBIENTAIS.
Bolsista: TATIANA DA SILVA FONSECA Nome em cit. bibliográficas: FONSECA, Tatiana S. Orientador(a): BODO WANKE Nome em cit. bibliográficas: WANKE, Bodo Coorientador(a): MARCIA DOS SANTOS LAZERA Nome em cit. bibliográficas: LAZERA, Márcia S. E-mail: TATY_UVA@YAHOO.COM.BR Unidade: IPEC Departamento: MICRO-IMUNO-PARASITO Lab. / Núcleo: SERVIÇO DE MICOLOGIA Evento: XIII Reunião Anual de Iniciação Científica
Resumo:
Coccidioidomicose (CM), micose sistêmica causada pelo fungo Coccidioides immitis, é adquirida através da inalação de conídios produzidos em solo de regiões áridas do continente americano. A região semiárida do Nordeste do Brasil foi incluída como área endêmica a partir de 1978, sendo o fungo demonstrado em humanos, cães, tatus e amostras de solo, nos estados do Ceará, Piauí, Maranhão e Bahia. Solo de tocas de pequenos animais e sítios arqueológicos destacam-se como sendo de maior risco de contaminação pelo fungo. O presente estudo visa: i) Extrair e amplificar DNA fúngico de amostras ambientais através de técnica de PCR com primers universais (28S do rDNA U1, U2) que identificam genes específicos do Reino Fungi; ii) Identificar seqüências gênicas específicas de C. immitis e outros fungos, aplicando sondas moleculares específicas para agentes de micoses sistêmicas (Sandhu et al. 1995). Foram analisadas amostras ambientais relacionadas a três microepidemias de CM, coletadas de locais suspeitos de contaminação por C. immitis (toca de tatu). Cinqüenta e seis (56) amostras de solo foram submetidas à técnica de extração de DNA com nitrogênio líquido (van Elsas 2000), obtendo-se DNA de todas elas. O extrato bruto de DNA das amostras de Caridade do Piauí foi purificado com o Kit Wizard Clean Up System. A amplificação do DNA destas amostras revelou presença do fragmento de 260 bp em 9 das amostras analisadas após a amplificação com os primers universais para a caracterização do Reino Fungi, região 28S do rDNA U1, U2. Comentários: A identificação de agentes de micoses sistêmicas através da metodologia clássica de inoculação animal é um instrumento de grande acurácia para amostras ambientais. O sucesso na extração de ácidos nucléicos diretamente do solo depende da metodologia empregada para desagregar as células microbianas das partículas do solo e da purificação da amostra após a extração do ácido nucléico, já que o solo contém argilas, metais, substâncias tóxicas, nucleases e material húmico, que inibem a reação da PCR, indicando a necessidade de obtenção de DNA mais puro, que permita amplificação por PCR, para obtenção de resultados que atendam aos objetivos propostos.
Publicado ou submetido? não Situação: Em execução
Palavras-chave: 1: Coccidioidomicose 2: Coccidioides immitis 3: Eco-epidemiologia da coccidioidomicose Título do projeto do orientador: ECO- EPIDEMIOLOGIA DA COCCIDIOIDOMICOSE NO ESTADO DO PIAUÍ E IDENTIFICAÇÃO MOLECULAR DO SEU AGENTE Coccidioides immitis
Programa/projeto: CNPq - FIOCRUZ/PIBIC Apoio financeiro: CNPq / FIOCRUZ Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Genética 2.02.00.00-5 Sub-Área: Genética Molecular e de Microorganismos 2.02.02.00-8 Especialidade:
CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR DE STAPHYLOCOCCUS ISOLADOS DE INFECÇÃO NOSOCOMIAL
Bolsista: Wagner Luis Mendes de Oliveira Nome em cit. bibliográficas: OLIVEIRA, Wagner L. M. Orientador(a): Nilma Cintra Leal Nome em cit. bibliográficas: LEAL, Nilma C. Coorientador(a): Tereza Cristina Leal-Balbino Nome em cit. bibliográficas: LEAL-BALBINO, Tereza C. E-mail: wagner.bio@ig.com.br Unidade: CPqAM Departamento: MICROBIOLOGIA Lab. / Núcleo: MICROBIOLOGIA CLÍNICA E MOLECULAR Evento: XIII Reunião Anual de Iniciação Científica
Resumo:
No gênero Staphylococcus está patógenos importantes, relacionados com infecção nosocomial apresentando uma incrível capacidade de resistência à antimicrobianos. Desta forma é comum encontrarmos isolados de Staphylococcus resistentes à meticilina (MRS). Essa resistência é mediada pelo gene cromossomal mecA que codifica uma PBP modificada (PBP2 ou PBP2a) com baixa afinidade à todos os antibióticos ²-lactâmicos. Além do mec um outro gene responsável pelo grau de resistência à meticilina, é o gene femB envolvido no metabolismo da parede celular. Dessa forma nos propomos à identificar a presença de genes de resistência à meticilina (oxacilina) através de multiplex-PCR e realizar tipagem molecular do gênero utilizando técnicas de ribotipagem-PCR e RAPD-PCR em cento e dezenove isolados do gênero Staphylococcus, oriundos de infecção nosocomial, procedentes do Hospital Universitário Oswaldo Cruz (HUOC), Recife/PE. Como resultado desta caracterização foi possível, observar que 68,1% das amostras apresentaram o gene mecA, sendo 60,9% de S. aureus e 87,5% de Staphylococcus Coagulase Negativo (SCN). Dentro dos isolados mec-positivo 35,8% dos S. aureus e 77,8% dos SCN foram sensíveis à oxacilina e denominados como pré-MRS. Entre os SCN 8,7% apresentaram-se resistentes e não carreadores do gene mecA, sugerindo para esses isolados uma possível superprodução de ²-lactamases. A amplificação do gene femB foi variável e não esclareceu a sua influência na resistência à meticilina. O perfil dos segmentos amplificados na região intergênica 16S-23S mostrou-se polimórfico, possibilitando agrupar os isolados em onze ribotipos. Com relação a técnica de RAPD-PCR foi possível notar uma extensa heterogeneidade genética entre os isolados. Os resultados obtidos com a ribotipagem-PCR e RAPD-PCR mostram que vários clones estão dispersos pelo hospital, no entanto chama a atenção a emergência de Staphylococcus Coagulase Negativo resistentes à meticilina naquele hospital.
Publicado ou submetido? não Situação: Em execução
Palavras-chave: 1: RESISTÊNCIA À METICILINA 2: RAPD-PCR 3: RIBOTIPAGEM-PCR Título do projeto do orientador: Padronização de métodos de diagnóstico e tipagem de Vibrio cholerae e de outras bactérias de interesse regional.
Programa/projeto: FACEPE Apoio financeiro: CNPq Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Genética 2.02.00.00-5 Sub-Área: Genética Molecular e de Microorganismos 2.02.02.00-8 Especialidade:
Tipagem Molecular de Staphylococcus aureus responsáveis por Mastite Bovina no estado de Pernambuco
Bolsista: Wellington Marques da Silva Nome em cit. bibliográficas: SILVA, Wellington M. S. Orientador(a): Tereza Cristina Leal Balbino Nome em cit. bibliográficas: LEAL-BALBINO, Tereza C. Coorientador(a): Franklin Gerônimo Bispo Santos Nome em cit. bibliográficas: SANTOS, Franklin G. B. E-mail: wmsbiologia@yahoo.com.br Unidade: CPqAM Departamento: Microbiologia Lab. / Núcleo: Microbiologia Clínica e Molecular Evento: XIII Reunião Anual de Iniciação Científica
Resumo:
O S. aureus é o principal responsável por casos de mastite e intoxicações alimentares, assumindo relevante importância para Saúde Pública, em virtude do risco potencial de sua veiculação ao homem, através do leite e derivados. Métodos de tipagem molecular são essenciais porque permite estabelecer a relação dos isolados epidemiologicamente relacionados baseado na análise do DNA. A análise do gene da coagulase (coa) através da PCR é um dos critérios utilizados para identificação de S. aureus, baseado no polimorfismo do gene. A digestão do produto da PCR com a enzima Alu I torna possível discriminar os S. aureus pelo polimorfismo no comprimento de restrição (PCR-RFLP). A técnica do RAPD-PCR, uma variação da PCR, usa um único iniciador direcionado a seqüências aleatórias do genoma. Dessa forma, esse estudo visa determinar feno e genotipicamente os S. aureus responsáveis por casos de mastite na região Agreste de Pernambuco. Foram analisadas 732 amostras de leite bovino através de provas bioquímicas. O DNA genômico foi obtido para os ensaios de PCR utilizando 10µg de lisostafina e 50µg de proteinase K para lise celular. Foram isolados 25 S. aureus em São Bento do Una, 13 em Caetés e sete em Correntes. Para tipagem molecular foram utilizadas as técnicas de PCR-RFLP do gene coa e o RAPD-PCR. A análise do gene coa dos 47 S. aureus produziu dois perfis genotípicos (P1=750pb, P2=1000pb). Após a clivagem com a enzima Alu I foram obtidos três coagulotipos, aumentando o poder discriminatório da técnica. Um total de 22 perfis foi obtido com o RAPD-PCR usando os iniciadores 786 e 797. As amplificações resultaram de três a vinte bandas com tamanhos entre 180>2000pb. Em conclusão, a tipagem molecular dos S. aureus pelo PCR-RFLP do gene da coagulase foi mais eficiente que o RAPD-PCR que se mostrou inconclusiva para um número grande de cepas. O PCR-RFLP do gene coa mostrou-se uma ferramenta útil e de fácil interpretação para estudos epidemiológicos de S. aureus.
Publicado ou submetido? não Situação: Em execução
Palavras-chave: 1: S. aureus 2: RAPD 3: Coagulase Título do projeto do orientador: Otimização do controle das mastites clínica e subclínica no rebanho leiteiro do Agreste de Pernambuco
Programa/projeto: FACEPE Apoio financeiro: Banco do Nordeste Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Genética 2.02.00.00-5 Sub-Área: Genética Molecular e de Microorganismos 2.02.02.00-8 Especialidade:
DETERMINAÇÃO DE MARCADORES MACROMOLECULARES PARA A IDENTIFICAÇÃO DE Solanum cernuum Vell.
Bolsista: Samanta Marengo Nome em cit. bibliográficas: MARENGO, Samanta Orientador(a): Tânia Maria de Almeida Alves Nome em cit. bibliográficas: ALMEIDA-ALVES, Tânia M. Coorientador(a): João Renato Stehmamn Nome em cit. bibliográficas: STEHMAMN, João R. E-mail: samanta@cpqrr.fiocruz.br Unidade: CPqRR Departamento: LQPN Lab. / Núcleo: Laboratório de Química de Produtos Naturais Evento: XIII Reunião Anual de Iniciação Científica
Resumo:
No Brasil estima-se que 80% da população utilize produtos naturais, principalmente as plantas medicinais como única fonte de recursos terapêuticos. Entretanto, a maioria das plantas medicinas consumidas é geralmente imprecisa na sua identificação taxonômica, afetando a qualidade e eficácia da droga vegetal. A espécie Solanum cernuum, conhecida como panacéia, é um vegetal muito utilizado pela população de Minas Gerais como hemostático, sudorífero e diurético, dentre outros usos. Estudos demonstraram que caracteres morfológicos podem ser empregados para a identificação desta espécie, quando comercializada inteira e caracteres anatômicos auxiliam na identificação da espécie, quando triturada. Com o objetivo de contribuir para o controle da qualidade de drogas comercializadas, inteiras ou trituradas, buscamos avaliar o emprego de técnicas de biologia molecular para a identificação da espécie através do seu genoma. Análise de espaçadores internos transcritos (ITS) do DNA ribossomal utilizando a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) fornece dados relevantes para estudos filogenéticos. Experimentos de padronização de técnicas estão sendo realizados para esta espécie, como extração do DNA e PCR, permitindo a amplificação e o sequenciamento das regiões ITS da espécie Solanum cernuum.
Publicado ou submetido? não Situação: Em execução
Palavras-chave: 1: Solanum cernuum 2: marcador macromolecular 3: ITS Título do projeto do orientador: Bioprospecção da Flora Regional em busca de Novas Drogas contra Doenças Endêmicas
Programa/projeto: CNPq - FIOCRUZ/PIBIC Apoio financeiro: CNPq/Fiocruz Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Genética 2.02.00.00-5 Sub-Área: Genética Vegetal 2.02.03.00-4 Especialidade:
Papel do CD40 na regulação da atividade microbicida de macrófagos
Bolsista: Bruna Ribeiro de Campos Monteiro Nome em cit. bibliográficas: MONTEIRO, Bruna R. C. Orientador(a): Marise P. Nunes Nome em cit. bibliográficas: NUNES, Marise P. Coorientador(a): Léa Cysne Finkelstein Nome em cit. bibliográficas: CYSNE-FINKELSTEIN, Léa E-mail: bricam@ig.com.br Unidade: IOC Departamento: Imunologia Lab. / Núcleo: Imunoparasitologia Evento: XIII Reunião Anual de Iniciação Científica
Resumo:
Investigamos o papel da via de sinalização CD40/CD154 na sensibilização primária da célula T CD4+ e seu efeito na atividade microbicida do macrófago contra Leishmania major em camundongos resistentes e suscetíveis. Nossos resultados mostraram que o engajamento do CD40 foi deletério para a resposta imune celular de camundongos BALB (suscetíveis), uma vez que aumentou a multiplicação da L. major, enquanto que o bloqueio da ligação do CD40 endógeno, através do anticorpo monoclonal neutralizante anti-CD40L, praticamente aboliu a multiplicação da L. major em macrófagos esplênicos. Os efeitos diferenciais do engajamento do CD40 foram exercidos ao nível da ativação do macrófago para que este exercesse uma atividade leishmanicida, e não está relacionado com a diferenciação da célula T CD4+ em Th1/Th2. Surpreendentemente, na presença de IFN-g exógeno, o engajamento do CD40 induziu à morte da L. major pelos macrófagos de fenótipo tanto resistente quanto suscetível. Estes resultados sugerem que o efeito da sinalização na resposta celular efetora contra L. major é dependente do genótipo do hospedeiro e das citocinas produzidas, e que uma fonte de IFN-g exógena é necessária para a resposta protetora de hospedeiros suscetíveis.
Publicado ou submetido? sim Situação: Aceito para publicação
Palavras-chave: 1: CD40/CD40L 2: Leishmania major 3: Macrófagos Título do projeto do orientador: Regulação da imunidade celular contra tripanosomatídeos por moléculas da superfamília do receptor de TNF
Programa/projeto: Edital IC - CNPq 05/2004 Apoio financeiro: CNPq e FAPERJ Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Imunologia 2.11.00.00-4 Sub-Área: Especialidade:
Estudo da participação de auto-anticorpos na resposta imune protetora contra malária em modelo de infecção murina.
Bolsista: Etiane Marcelino da Cunha Nome em cit. bibliográficas: CUNHA, Etiane M. Orientador(a): Claudio Tadeu Daniel Ribeiro Nome em cit. bibliográficas: DANIEL-RIBEIRO, Claudio T. Coorientador(a): Graziela Maria Zanini Nome em cit. bibliográficas: ZANINI, Graziela E-mail: etiane@ioc.fiocruz.br Unidade: IOC Departamento: Imunologia Lab. / Núcleo: Pesquisas em malária Evento: XIII Reunião Anual de Iniciação Científica
Resumo:
Auto-anticorpos contra várias especificidades (DNA de dupla e simples fita, antígenos nucleares, antígenos eritrocitários, etc.) são frequentemente encontrados no soro de pacientes com malária. Entretanto, não existe nenhuma evidência de que tais anticorpos possam ser danosos ao organismo, causando autoimunidade. Ao contrário, dados epidemiológicos e experimentais sugerem que a infecção malárica pode diminuir a incidência de doenças autoimunes, exercendo assim um efeito protetor contra tais patologias. Baseado em algumas evidências, nós propusemos que o efeito oposto também pode ser verdadeiro, ou seja, que auto-anticorpos podem ter um efeito protetor contra a malária. Para testar essa hipótese, verificamos que soros de indivíduos com uma doença autoimune típica, o lupus eritematoso sistêmico (LES), reagem com antígenos plasmodiais e, principalmente, são capazes de inibir o crescimento in vitro de Plasmodium falciparum. O objetivo do presente projeto é avaliar se auto-anticorpos são capazes de inibir o crescimento parasitário também in vivo. Para isso, faremos uso de um modelo murino de infecção malárica por Plasmodium yoelii. Camundongos foram infectados repetidas vezes com inóculos crescentes do parasita, até ficarem totalmente refratários à infecção. Os camundongos foram sacrificados e o soro coletado. As imunoglobulinas do pool de soros foram precipitadas com sulfato de amônio e serão utilizadas para purificar auto-anticorpos formados durante a infecção (anti-DNA, anti-cardiolipina e anti-actina), utilizando cromatografia de afinidade. Para isso, colunas contendo esses antígenos montados em matriz de Sepharose ou celulose foram preparadas. As imunoglobulinas serão passadas nessas colunas, que serão lavadas e eluídas com tampão glicina, dialisadas e concentradas. A reatividade dos anticorpos contra os respectivos autoantígenos e contra o parasita será avaliada (ELISA e imunofluorescência). Os autoanticorpos purificados serão então transferidos passivamente para camundongos Balb/c que serão então inoculados com P. yoelii. O acompanhamento da parasitemia permitirá avaliar se os auto-anticorpos tiveram efeito inibidor sobre o crescimento do parasita in vivo.
Publicado ou submetido? não Situação: Em execução
Palavras-chave: 1: Malária 2: Auto-anticorpos 3: Infecção murina Título do projeto do orientador: Estudo da participação de auto-anticorpos na resposta imune protetora contra malária em modelo de infecção murina.
Programa/projeto: CNPq - FIOCRUZ/PIBIC Apoio financeiro: IOC - CNPq Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Imunologia 2.11.00.00-4 Sub-Área: Especialidade: Cellular and humoral immune responses to P. vivax Merozoite Surface Protein 9 (PvMSP9) in naturally exposed individuals from Rondônia State-Brazil. Aluno: Josué da Costa Lima Junior Nome em cit. bibliográficas: LIMA-JÚNIOR. Josué C. Vínculo Institucional: Tipo de Bolsa: CNPq E-mail: josue@ioc.fiocruz.br Curso: Mestrado em Biologia Parasitária Ano de Ingresso: 2004 Orientador(a): Joseli de Oliveira Ferreira Nome em cit. bibliográficas: OLIVEIRA-FERREIRA, Joseli Segundo(a) orientador(a): Nome em cit. bibliográficas: Pesquisador(a) Colaborador(a): Mary R. Galinski Nome em citações bibliográficas: GALINSKI, Mary R. Área de Concentração: Imuno-epidemiologia Evento: IX Jornada Científica da Pós-Graduação
Resumo:
Merozoite Surface Protein-9 of Plasmodium vivax has orthologs in several malaria parasite species including the P. falciparum surface antigen known as ABRA. PvMSP-9 consists of 979 amino acids and possesses a putative signal peptide, a cluster of four cysteines within the N-terminus region, and two species-specific blocks of tandem repeats at the C-terminus. We have demonstrated that a P. vivax monoclonal antibody and polyclonal antiserum against the native P. cynomolgi MSP-9 inhibit erythrocyte invasion of P. vivax merozoites in vitro and that PvMSP-9 is immunogenic in mice. In this study we evaluate the antibody and T cell reactivity to PvMSP-9 in individuals naturally exposed to malaria infections. In a cross-sectional study carried out in Porto Velho, Rondônia state, Brazil, cells and sera from individuals living in Ribeirinha (N=188), a riverine native community along the Madeira river a tributary of the Amazon river and Colina, a transmigrant community living in a rural area close to Porto Velho (N=122), were assessed for IFN-³ and IL-4 cellular response by ELISPOT using PvMSP-9 synthetic peptides and for IgG antibody responses to PvMSP-9 recombinant proteins by ELISA. Our preliminary data show that individuals naturally exposed to P. vivax malaria infections presented a cellular immune response to 6 of the 11 PvMSP-9 derived peptides. However the cytokine profiles were different between the two communities. In Ribeirinha, the native population, the frequency of positives individuals was similar for IFN-³ and IL-4 and most immunogenic peptides were MSP9A (22.8%) and MSP9H (22.4%) for IFN-³ and MSP9L (24.4%) and MSP9J(18%) for IL-4. In Colina, the transmigrant population, the frequency of positive individuals was mainly for IFN-³and the most immunogenic peptides were MSP9L (29.8%), MSP9E and MSP9H (29.2%), for IL-4 the higher frequency was observed in MSP9L (9.5%). Studies are in progress to evaluate the antibody response in these communities and the association between cellular and humoral immune responses may provide information on the characteristics of acquired immunity to this P. vivax antigen and its potential as a vaccine candidate. Palavras-chave: 1: PvMSP9 2: Humoral response 3: Cellular Immune Response Apoio financeiro: 1: NIH 2: Fiocruz 3:
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Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Imunologia 2.11.00.00-4 Sub-Área: Especialidade: Apoptose em formas sangüíneas do Plasmodium falciparum sob estresse de anticorpos antiplasmodiais ou de óxido nítrico Aluno: Paulo Renato Rivas Totino Nome em cit. bibliográficas: TOTINO, Paulo R. R. Vínculo Institucional: Bolsista Tipo de Bolsa: CNPq E-mail: prtotino@ioc.fiocruz.br Curso: Mestrado em Biologia Celular e Molecular Ano de Ingresso: 2004 Orientador(a): Maria de Fátima Ferreira da Cruz Nome em cit. bibliográficas: FERREIRA-DA-CRUZ, Maria F. Segundo(a) orientador(a): Nome em cit. bibliográficas: Pesquisador(a) Colaborador(a): Cláudio Tadeu Daniel-Ribeiro; Suzana Corte Real; Andrea Henriques Pons Nome em citações bibliográficas: DANIEL-RIBEIRO, Cláudio T. ; CÔRTE-REAL, Suzana ; HENRIQUES-PONS, Andrea Área de Concentração: Imunologia Evento: IX Jornada Científica da Pós-Graduação
Resumo:
Diversos trabalhos têm mostrado que diferentes grupos de protozoários podem ser susceptíveis a morte celular programada (PCD). No gênero Plasmodium eventos apoptóticos foram observados em zigotos e oocinetos de P. berghei, tanto in vitro quanto in vivo, e em formas sangüíneas de uma cepa de P. falciparum sensível a cloroquina, quando cultivada na presença desta droga. Na infecção malárica pelo P. falciparum a produção de anticorpos estágio-específicos e de óxido nítrico (ON) desempenham um papel considerável no controle do desenvolvimento das formas sangüíneas. A importância dos anticorpos na proteção contra o P. falciparum foi demonstrada em experimentos de transferência passiva e em estudos in vitro. A inibição do crescimento do P.falciparum também já foi constatada após tratamento do cultivo com NO e, em indivíduos infectados foi verificado que a baixa parasitemia estava associada aos maiores níveis de NO. Tendo em vista que a morte via apoptose poderia funcionar como um mecanismo de escape para o parasita, já que não conduz a uma reação inflamatória, e considerando que parasitas do gênero Plasmodium são capazes de deflagrar um processo de PCD decidimos avaliar se a morte in vitro do P. falciparum frente a anticorpos específicos ou ao NO é marcada por fenômenos apoptóticos. Para a consecução de nosso objetivo os parasitas serão cultivados na presença de diferentes concentrações de anticorpos (IgG) anti-P. falciparum obtidos de coelhos imunizados ou de S-nitroso-acetilpenicilamina (SNAP), um potente doador de NO. Após o estresse imunológico, os parasitas serão morfologicamente caracterizados por microscopia eletrônica de transmissão. A fragmentação do DNA será evidenciada por eletroforese em gel de agarose e pelo método de TUNEL através da citometria de fluxo. As alterações do potencial transmembrana mitocondrial também será analisada por citometria de fluxo. Uma outra estratégia que usaremos será a investigação de uma polimerase poli(ADP-ribose) (PARP)-like cuja clivagem estaria associada aos processos apoptóticos, além da utilização de um inibidor geral de caspases para averiguarmos a participação de proteases com atividade de caspases-like. Palavras-chave: 1: Malária 2: Apoptose 3: P. falciparum Apoio financeiro: 1: Fiocruz 2: 3:
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Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Imunologia 2.11.00.00-4 Sub-Área: Especialidade:
Estudo sobre a expressão e atividade funcional do receptor Fc³RII em células T cardíacas na infecção por Tripanosoma cruzi.
Bolsista: Rafaela Lopes Diniz Nome em cit. bibliográficas: DINIZ, Rafaela L. Orientador(a): Andrea Henrique Pons Nome em cit. bibliográficas: HENRIQUES-PONS, Andréa Coorientador(a): Nome em cit. bibliográficas: E-mail: faeal_bio@yahoo.com.br Unidade: IOC Departamento: Ultra-Estrutura e Biologia Celular Lab. / Núcleo: Laboratorio de Biologia Celular Evento: XIII Reunião Anual de Iniciação Científica
Resumo:
Os receptores Fc gama (FcgR) reconhecem a porção Fc da molécula de IgG e são expressos na maioria das células hematopoeticas. Processamento alternativo do subtipo FcgRIIB pode gerar três isoformas, com uma sequência ITIM capaz de inibir atividade celular. Células B expressam constitutivamente FcgRIIB1 na membrana celular e sabe-se que a co-agregação do receptor de célula B (BCR) com FcgRIIB1 provoca uma modulação negativa de suas funções efetoras. Por outro lado, linfócitos T não apresentam constantemente em sua superfície o receptor FcgRIIB1, e acredita-se que o acoplamento do receptor de célula T (TCR) com um antígeno provocará a expressão do receptor Fc por um período tempo. Além disso, a expressão de FcgRIIB1 em células T é variável e diretamente afetada pelo estado de ativação celular em subpopulações heterogêneas. Experimentos in vitro sugeriram que a co-agregação de FcgRIIB1 e do TCR em linfócitos T pode também regular negativamente atividade celular. Entretanto, a modulação da atividade funcional destas células pelo receptor ainda é incerto. Nosso projeto procura ajudar a esclarecer aspectos importantes destas interações moleculares capazes de regular negativamente a resposta imune inata e adquirida. A infecção por Trypanosoma cruzi induz severa miocardite com infiltração celular inflamatória majoritariamente composta por linfócitos T. Assim pretendemos avaliar a expressão de FcgRII em linfócitos cardíacos na fase aguda da infecção e em todas as sub populações de linfócitos encontrados no tecido. Estamos isolando e purificando cada uma das sub populações linfocitárias cardíacas para induzir co-agregação in vitro dos receptores FcgRII e TCR, avaliando se há modulação negativa referente à secreção de citocinas e atividade citotóxica. Nós estamos estudando a hipótese de que anticorpos contra epítopos do parasita, ou do coração, exporiam suas porções Fc para os linfócitos inflamatórios FcgRII+ durante a interação TCR/MHC-peptídio. Esta configuração molecular nas células T do infiltrado inflamatório cardíaco pode ser, em parte, responsável pela reduzida atividade funcional de células T CD8+ cardíacas obtidas na fase crônica da infecção
Publicado ou submetido? não Situação: Em execução
Palavras-chave: 1: Trypanosoma cruzi 2: Linfócito T 3: receptor FcgRII Título do projeto do orientador: Estudo sobre a expressão e atividade funcional do receptor Fc³RII em células T cardíacas na infecção por Tripanosoma cruzi.
Programa/projeto: CNPq - FIOCRUZ/PIBIC Apoio financeiro: CNPq/FIOCRUZ Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Imunologia 2.11.00.00-4 Sub-Área: Especialidade: Investigação sobre a origem das células de defesa (amebócitos) na Biomphalaria glabrata. Aluno: Samaly dos Santos Souza Nome em cit. bibliográficas: SOUZA, Samaly S. Vínculo Institucional: Estagiário Tipo de Bolsa: CAPES E-mail: samalysouza@hotmail.com Curso: Mestrado em Ciências da Saúde Ano de Ingresso: 2004 Orientador(a): Zilton de Araujo Andrade Nome em cit. bibliográficas: ANDRADE, Zilton A. Segundo(a) orientador(a): Nome em cit. bibliográficas: Pesquisador(a) Colaborador(a): Nome em citações bibliográficas: Área de Concentração: Imunologia Evento: IX Jornada Científica da Pós-Graduação
Resumo:
As reações de defesa contra microorganismos são realizadas nos moluscos do gênero Biomphalaria por um único tipo de célula o hemócitos ou amebócito. O seu local de origem ainda é incerto. Na Biomphalaria glabrata admite-se que essas células se originam em um órgão situado na parede anterior do saco pericárdico denominado APO (Amebocyte Producing Organ). A ocorrência de hiperplasia e mitoses no APO, durante a infecção pelo Schistosoma mansoni, tem sido tomada como o principal argumento para considerá-lo um órgão hematopoiético. O trabalho estuda a localização, forma, e comportamento do APO em B. glabrata normal e após infecção pelo S.mansoni, no intuito de compreender o seu papel nas reações de defesa. A investigação foi feita através estudo histopatológico, ultraestrutural e imuno-histoquímico. O APO apareceu representado por coleções de células basófilas, compactamente arrumadas, com núcleos redondos, ricos em cromatina e citoplasma homogêneo, escasso, formando grupos ou fileiras ao longo de uma estreita região da membrana pericárdica, com raras variações entre infectados e não-infectados, como a presença de mitose, ocasionalmente vista nos primeiros. A microscopia eletrônica revelou que o órgão é formado por células epiteliais justapostas, unidas por interdigitações, ricas em mitocôndrias, e com muitas microvilosidades na sua superfície livre. Dados iniciais com o anticorpo monoclonal contra o antígeno Ki67, que revela fator de proliferação nuclear, deram forte positividade para esporocistos e cercárias, mas não evidenciaram marcação no APO.
Por outro lado, foram vistos acúmulos de hemócitos no interior de vários tecidos e nas cavidades de vários órgãos, especialmente no coração, nos animais infectados. Estes achados se correlacionaram melhor com a hipertrofia e hiperplasia das células dos revestimentos dos espaços lacunares, do que com as escassas modificações presentes no APO. Conclui-se que os presentes achados morfológicos apontam para uma origem multicêntrica dos hemócitos da B. glabrata, a partir do endotélio dos espaços vasculares (como sugerido nos estudos mais antigos).
Palavras-chave: 1: APO 2: Schistosoma mansoni 3: Biomphalaria glabrata Apoio financeiro: 1: CAPES 2: CNPq 3:
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Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Imunologia 2.11.00.00-4 Sub-Área: Especialidade:
ATIVAÇÃO DA TRANSCRIÇÃO DO GENE rasgef1b INDUZIDA POR AGONISTAS INFLAMATÓRIOS DO TIPO TOLL.
Bolsista: Suzana Antunes Lourençoni Garcia Nome em cit. bibliográficas: GARCIA-LOURENÇONI, Suzana A. Orientador(a): Aristóbolo Mendes da Silva Nome em cit. bibliográficas: SILVA, Aristóbolo M. Coorientador(a): Ricardo Tostes Gazzinelli Nome em cit. bibliográficas: GAZZINELLI, Ricardo T. E-mail: suzana@cpqrr.fiocruz.br Unidade: CPqRR Departamento: Biologia Molecular e Celular Lab. / Núcleo: Imunopatologia Evento: XIII Reunião Anual de Iniciação Científica
Resumo:
O gene rasgef1b é um novo membro da família de fatores de troca de nucleotídeos guanina de Ras (RasGEFs) cuja identificação é o primeiro exemplo de um Ras em que a expressão é induzida em resposta a um estímulo inflamatório. Em sua provável região promotora foram encontrados, através de análises in silico, elementos regulatórios para o fator de transcrição NF-ºB, o qual é de fundamental importância na regulação da resposta imune inata. Foi demonstrado originalmente que o gene rasgef1b teve sua expressão fortemente induzida em macrófagos estimulados com âncoras tGPI derivadas do T. cruzi, as quais são reconhecidas pelo receptor do tipo Toll TLR2. Sendo assim, levantou-se a hipótese se outros agonistas inflamatórios do tipo Toll poderiam induzir a expressão do gene rasgef1b. Observamos que em células RAW264.7, uma linhagem de macrófagos murinos, a expressão do rasgef1b foi significativamente aumentada na presença de LPS (endotoxina bacteriana) ou de poly-IC (RNA de fita dupla sintético), agonistas dos receptores TLR4 e TLR3, respectivamente. Observamos ainda que a expressão induzida do rasgef1b, assim como de outros genes pró-inflamatórios como o TLR2 e o IFN-², foi inibida na presença de TPCK (N-Tosyl-PhenylChloroMethyl Ketone), um inibidor farmacológico de NF-ºB. Esses resultados suportam a idéia de que a expressão do rasgef1b induzida por agonistas inflamatórios do tipo Toll seja dependente do fator de transcrição NF-ºB. Para melhor entendermos os mecanismos da ativação transcricional do gene rasgef1b, decidimos amplificar e clonar a provável região promotora do gene para a realização de ensaios de gene repórter que nos auxiliará em compreender a participação de RasGEFs na resposta imune inata.
Publicado ou submetido? não Situação: Em execução
Palavras-chave: 1: receptor tipo Toll 2: NF-ºB 3: rasgef1b Título do projeto do orientador: DEFINIÇÃO DOS MECANISMOS MOLECULARES MEDIADOS PELO FATOR DE TROCA DE NUCLEOTÍDEOS GUANINA rasgef1b DURANTE A RESPOSTA INFLAMATÓRIA.
Programa/projeto: Edital IC - CNPq 05/2004 Apoio financeiro: CNPq, Convênio CNPq/Fiocruz, PDTIS, PAPES III, CPqRR/Fiocruz Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Imunologia 2.11.00.00-4 Sub-Área: Especialidade:
Malária cerebral murina por Plasmodium berghei ANKA: reatividade e fenótipo de timócitos e linfócitos e sua relação com a imunopatologia
Bolsista: Yuri Chaves Martins Nome em cit. bibliográficas: MARTINS, Yuri C. Orientador(a): Leonardo José de Moura Carvalho Nome em cit. bibliográficas: CARVALHO, Leonardo J. M. Coorientador(a): Claudio Tadeu Daniel Ribeiro Nome em cit. bibliográficas: RIBEIRO, Claudio T. D. E-mail: yuri@ioc.fiocruz.br Unidade: IOC Departamento: Departamento de Imunologia Lab. / Núcleo: Laboratório de Pesquisas em Malária Evento: XIII Reunião Anual de Iniciação Científica
Resumo:
Uma das principais limitações para o desenvolvimento de vacinas antimaláricas reside na escassa compreensão de mecanismos imunológicos responsáveis pela aquisição e manutenção de imunidade. Intensa e extensa ativação celular podem estar na origem da deficiência da resposta imune e na manifestação de quadros patológicos, como malária cerebral (MC). Nosso grupo descreveu recentemente características da reatividade em órgãos linfóides (depleção de timócitos, hiperativação de células B com apoptose e deficiência na diferenciação em centros germinativos), no modelo de infecção de camundongos CBA por Plasmodium berghei ANKA, que podem ter influência na ineficácia da resposta imune montada e na imunopatologia na malária. Assim, propomos a utilização de várias abordagens para analisar em maior detalhe esses fenômenos. Em uma primeira abordagem, avaliamos as alterações no timo, baço e linfonodos de camundongos CBA durante a infecção por P. berghei ANKA. Comparativamente, analisamos as alterações em uma linhagem que não desenvolve MC (Balb/c). Apesar de não ser susceptível à MC, os Balb/c apresentaram parasitemia mais elevada e com alta e precoce mortalidade, com todos os animais morrendo no dia 8 de infecção. No caso, dos CBA, 75% dos animais fizeram MC, morrendo ou sendo sacrificados nos dias 6-10 de infecção. A citometria mostrou leve diminuição na porcentagem de células duplo positivas no timo, nos dois grupos, no dia 3 de infecção. Em ambas as linhagens, houve atrofia tímica no período entre 6-10 dias de infecção, com acentuada queda de células CD4+CD8+ duplo-positivas, havendo aumento de células simples positivas. Nos órgãos linfóides secundários, não houve alterações evidentes. Experimentos em curso têm por objetivo aprofundar essas análises e verificar o papel de moléculas como galectinas na atrofia tímica e de marcadores de ativação, diferenciação e morte celular no processo de desestruturação de centro germinativo em órgãos linfóides secundários.
Publicado ou submetido? não Situação: Em execução
Palavras-chave: 1: Malária 2: Malária Cerebral 3: Modelo murino Título do projeto do orientador: Utilização do modelo experimental murino de infecção por Plasmodium berghei ANKA para estudos de imunidade e patogenia de malária
Programa/projeto: CNPq - FIOCRUZ/PIBIC Apoio financeiro: CNPq Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Imunologia 2.11.00.00-4 Sub-Área: Especialidade: Characterization of genetic and immunological factors using candidates proteins to tuberculosis vaccine related to susceptibility to Mycobacterium tuberculosis infection (latency), illness and clinical outcome. Aluno: Ana Cristina Camara Santiago Leandro Nome em cit. bibliográficas: SANTIAGO-LEANDRO, Ana C. C. Vínculo Institucional: Bolsista Tipo de Bolsa: CAPES E-mail: santiago@ipec.fiocruz.br Curso: Doutorado em Biologia Parasitária Ano de Ingresso: 2003 Orientador(a): Maria da Glória Bonecini de Almeida Nome em cit. bibliográficas: BONECINI-ALMEIDA, Maria G. Segundo(a) orientador(a): Nome em cit. bibliográficas: Pesquisador(a) Colaborador(a): Robert J. Wilkinson Nome em citações bibliográficas: WILKINSON, Robert J. Área de Concentração: Imunogenética Evento: IX Jornada Científica da Pós-Graduação
Resumo:
Tuberculosis (TB) remains one of the most important infectious diseases in the world. Eight to twelve million new cases of active tuberculosis occur each year. These cases result in 3 million deaths annually, making tuberculosis the single leading cause of death of any infectious disease. Several observational studies indicate that certain populations appear to exhibit unusual susceptibility to tuberculosis, and it is likely that to a certain degree this susceptibility has a genetic basis. Susceptibility after infection with Mycobaterium tuberculosis (Mtb) is influenced by environmental and host genetics factors. Despite the apparent susceptibility of various populations, the actual genetic basis for vulnerability to tuberculosis is obscure; susceptibility is probably a polygenetic predisposition that has major interactions with the environment. Polymorphisms in several candidates genes have been linked to relatively increased risk for tuberculosis disease. Genetic loci implicated in human susceptibility to TB include genes encodes vitamin D receptor (VDR) and Vitamin D binding protein (VDBP). Vitamin D (VD) metabolism leads to activation of macrophages and restricts the intracellular growth of Mtb . This effect may be influenced by polymorphism at four sites in the VDR: TaqI, FokI, BsmI and ApaI. The VDBP is the main systemic transporter of VD and is essential for its cellular endocytosis. The VDBP gene contains two sites of polymorphisms in the exon 11 (HaeIII and StyI) that leads to differences in the affinity for VD and the importance of VDBP for systemic VD levels led us to investigate this variants in patients with tuberculosis and trying to correlate with the prognostic in these patients. To identify the high incidence and the prognostic of TB, VDR TaqI, FokI, BsmI, ApaI and VDBP StyI and HaeIII were compared among 116 patients with pulmonary TB and healthy control subjects. Our preliminary results demonstrated that possibly exists a association between the polymorphisms to VDR FokI and VDBP HaeIII and StyI and with the susceptibility to TB, but is necessary to increase the cohort to confirm this significancy. Palavras-chave: 1: Mycobacterium tuberculosis 2: Polymorphisms 3: susceptibility Apoio financeiro: 1: Fiocruz 2: CAPES 3: Imperial College
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Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Imunologia 2.11.00.00-4 Sub-Área: Imunogenética 2.11.03.00-3 Especialidade:
Análise da expressão gênica de metaloproteinases de matriz em células de Schwann da linhagem ST88-14
Bolsista: Ariane Leite de Oliveira Nome em cit. bibliográficas: OLIVEIRA, Ariane L. Orientador(a): Elisabeth Pereira Sampaio Nome em cit. bibliográficas: SAMPAIO, Elizabeth P. Coorientador(a): Rosane Magda Brandão Teles Nome em cit. bibliográficas: TELES, Rosane M. B. E-mail: ariunirio@yahoo.com.br Unidade: IOC Departamento: Micobacteriose Lab. / Núcleo: Hanseníase Evento: XIII Reunião Anual de Iniciação Científica
Resumo:
INTRODUÇÃO: A participação das metaloproteinases de matriz (MMPs) na lesão tecidual vem sendo descrita em diversas doenças, principalmente doenças do sistema nervoso central (SNC) e periférico, câncer e em doenças infecciosas, como a tuberculose. A hanseníase é caracterizada por lesões de pele e nervos periféricos, este último conseqüente à interação do M. leprae com as células de Schwann. OBJETIVOS: Avaliar a expressão de MMPs, TACE e TNF-a em resposta ao M. leprae em cultura de células de Schwann (linhagem ST88-14) além de avaliar a secreção e atividade proteolítica dessas moléculas nos sobrenadantes das culturas de células. METODOLOGIA: Células da linhagem ST88-14 foram cultivadas e incubadas ou não com M.leprae. Em seguida, o RNA total das células foi extraído e sua integridade avaliada em gel de agarose. Depois, foi realizada a transcrição reversa para síntese de cDNA. A expressão de MMPs, TACE e TIMP-1 e TNF-a foi avaliada por RT-PCR. Paralelamente, a atividade proteolítica de MMP-2 e MMP-9 foi, avaliada por Zimografia. RESULTADOS: A expressão de RNAm de MMPs e TIMP-1 foi detectada constitutivamente na linhagem ST8814. Porém, quando esta linhagem foi estimulada com M. leprae na proporção de 50:1 (bactéria: célula) a expressão de RNAm de MMP-2, MMP-9 estava aumentada em relação às células não estimuladas. A expressão de TIMP-1 não foi alterada pelo estímulo com o M. leprae, em relação ao controle sendo expressa constitutivamente nas células. A expressão gênica dessas moléculas também teve um aumento quando as células foram estimuladas com TNF-a por 3h. A expressão de gênica de TACE nessas culturas sofreu uma redução gradativa. Houve também um aumento da atividade proteolítica das pró-enzimas, principalmente MMP-9, quando estimuladas com ML. ML+INFg e LPS por 24h. CONCLUSÃO: É possível, portanto que semelhante à tuberculose, MMPs estejam envolvidas na manutenção e indução da lesão nos estados reacionais da Hanseníase. Neste contexto, estas proteases, principalmente MMP-2 e 9, podem estar sendo produzidas no sítio de lesão, induzidas pelo M. leprae e/ou citocinas inflamatórias.
Publicado ou submetido? não Situação: Em execução
Palavras-chave: 1: Metaloproteinases 2: Hanseníase 3: Células de Schwann Título do projeto do orientador: Novas abordagens no estudo molecular e genético para compreender a lesão de nervo na Hansenáse
Programa/projeto: CNPq - FIOCRUZ/PIBIC Apoio financeiro: PIBIC/CNPq Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Imunologia 2.11.00.00-4 Sub-Área: Imunogenética 2.11.03.00-3 Especialidade: Caracterização parcial de alguns genes de citocinas nos modelos primatas Aotus infulatus e Saimiri sciureus Aluno: Francisco Acácio Alves Nome em cit. bibliográficas: ALVES, Francisco A. Vínculo Institucional: Aluno Tipo de Bolsa: CNPq E-mail: alvesf@ioc.fiocruz.br Curso: Doutorado em Biologia Celular e Molecular Ano de Ingresso: 2004 Orientador(a): Leonardo José de Moura Carvalho Nome em cit. bibliográficas: CARVALHO, Leonardo J. M. Segundo(a) orientador(a): Cláudio Tadeu Daniel Ribeiro Nome em cit. bibliográficas: DANIEL-RIBEIRO, Cláudio T. Pesquisador(a) Colaborador(a): Maria Paula Cruz Schneider Nome em citações bibliográficas: SCHNEIDER, Maria P. Área de Concentração: Imunogenética Evento: IX Jornada Científica da Pós-Graduação
Resumo:
A malária é a doença parasitária de maior prevalência no mundo. Apesar dos inúmeros estudos realizados, pouco se sabe a respeito dos mecanismos de aquisição de imunidade e patologia na malária. Primatas neotropicais dos gêneros Aotus e Saimiri são modelos importantes para estudos desses mecanismos, pois podem ser infectados por Plasmodium falciparum e Plasmodium vivax. Entretanto, um problema maior com esses modelos é a carência de ferramentas disponíveis para avaliar, por exemplo, a resposta imune durante a infecção malárica. O objetivo do presente trabalho é o de sequenciar genes do sistema imune desses primatas para posterior desenvolvimento de ferramentas moleculares para estudos imunológicos. Assim, utilizamos o programa gratuito PerlPrimer 1.1.6 para desenhar os iniciadores diretor e reversos usando como molde as sequências codificantes completas do genoma humano depositadas no Genbank. Os genes escolhidos a princípio foram IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL10, BCL-2, CSF-2, CSF-3, IFN-gama e TNF-alfa, com amplicons de 296 pb, 595 pb, 513 pb, 300 pb, 838 pb, 509 pb, 285 pb, 306 pb, 400 pb, 348 pb e 342 pb, respectivamente. Os fragmentos gênicos foram amplificados através da técnica de PCR e posteriormente purificados e sequenciados. As análises de homologia, distância gênica e árvore filogenética dos amplificados obtidos estão em andamento. Palavras-chave: 1: Citocinas 2: Aotus infulatus 3: Saimiri sciureus Apoio financeiro: 1: CNPq 2: Fiocruz 3:
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Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Imunologia 2.11.00.00-4 Sub-Área: Imunogenética 2.11.03.00-3 Especialidade:
Desenvolvimento de vacinas: Caracterização da resposta imunogênica à preparação vacinal pAG831 no modelo murino
Bolsista: Roberta Coelho Pereira de Souza Nome em cit. bibliográficas: SOUZA, Roberta C. P. Orientador(a): Cynthia Horn Nome em cit. bibliográficas: HORN, Cynthia Coorientador(a): Joseli Lannes Vieira Nome em cit. bibliográficas: LANNES-VIEIRA, Joseli E-mail: robcoelho_br2003@yahoo.com.br Unidade: IPEC Departamento: Departamento de Mirco-Imuno - Parasitologia Lab. / Núcleo: Serviço de Imunologia Evento: XIII Reunião Anual de Iniciação Científica
Resumo:
A tuberculose, causada pelo Mycobacterium tuberculosis, é um grave problema de Saúde Pública mundial, responsável por aproximadamente 2 milhões de mortes anuais. Utilizado há quase cem anos, o Bacilo Calmette Guérin (BCG) ainda é a única vacina existente contra a doença, contudo, a sua eficácia é controversa. É sabido que a utilização de uma vacina viva (BCG) apresenta nos indivíduos imunocomprometidos risco de desenvolvimento de efeitos patológicos. As vacinas gênicas, associadas a certos adjuvantes, são objetos de estudos recentes e representam uma alternativa importante na obtenção de uma proteção efetiva e duradoura, induzindo resposta imune celular Th1 e Th2 requeridas pelos patógenos intracelulares (M. tuberculosis). A maior parte das vacinas testadas atualmente utiliza proteínas antigênicas provenientes de filtrados de cultura (FC) de M. tuberculosis, indutoras de imunidade protetora. Incluir antígenos que melhorem as respostas benéficas e excluam componentes deletérios potenciais seriam as grandes vantagens trazidas por estas vacinas. Recentemente, microesferas poliméricas têm surgido como uma estratégia interessante a ser empregada no processo de vacinação por apresentarem baixa toxicidade. Visto que o antígeno APA foi capaz de induzir resposta Th1 e Th2, assim como efeito protetor significativo contra um desafio pelo M. tuberculosis em camundongos, nos propomos a caracterizar este antígeno como protótipo vacinal. Para tal, diferentes construções plasmidiais contendo apa, encapsulado em microesferas biodegradáveis, serão inoculadas por via intramuscular em camundongos BALB/c, que terão sua resposta imune caracterizada por detecção de anticorpos específicos e resposta imune proliferativa, com caracterização da produção de citocinas. Esperamos assim mostrar um aumento da imunogenicidade do antígeno APA contribuindo deste modo para o desenvolvimento de uma nova vacina para tuberculose.
Publicado ou submetido? não Situação: Em execução
Palavras-chave: 1: Vacina gênica 2: Resposta imune 3: Tuberculose Título do projeto do orientador: Caracterização do antígeno APA como protótipo vacinal em sistemas de liberação controlada, microesferas, em modelo experimental
Programa/projeto: CNPq - FIOCRUZ/PIBIC Apoio financeiro: PDTIS-FIOCRUZ Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Imunologia 2.11.00.00-4 Sub-Área: Imunogenética 2.11.03.00-3 Especialidade: Ensaios com vacinas recombinantes (DNAs) de Leishmania contra leishmaniose cutânea experimental induzida pela L. major no modelo primata Macaca mullatta da doença humana. Aluno: Aline Paula de Oliveira Nome em cit. bibliográficas: PAULA-OLIVEIRA, Aline Vínculo Institucional: bolsista Tipo de Bolsa: CAPES E-mail: apoliveira@ioc.fiocruz.br Curso: Mestrado em Biologia Parasitária Ano de Ingresso: 2005 Orientador(a): Gabriel Grimaldi Júnior Nome em cit. bibliográficas: GRIMALDI-JÚNIOR, Gabriel Segundo(a) orientador(a): Renato Porrozzi Nome em cit. bibliográficas: PORROZZI, Renato Pesquisador(a) Colaborador(a): Jennifer Blackwell Nome em citações bibliográficas: BLACKWELL, Jennifer Área de Concentração: Imunologia Evento: IX Jornada Científica da Pós-Graduação
Resumo:
As leishmanioses têm impacto mundial na Saúde Pública, afetando pelo menos dois milhões de indivíduos anualmente em 88 países endêmicos (www.who.int/tdr/diseases). A estratégia mais racional de controlar a endemia seria com programas de vacinação. Estudos revelam a ineficácia de vacinas atenuada ou morta contra LC humana (MemIOC 1995, 95:553). Vacinas de segunda geração ((DNA/proteínas recombinantes de Leishmania) são muito eficazes em modelos murinos (Trends Parasitol 2005, 21:244), porém devem ser testadas em modelos símios, visando confirmar a segurança e eficácia dos regimes a serem adotados na proteção clínica contra as leishmânias. A homologia do sistema imune entre símios e humanos faz crer que vacinas eficazes no modelo símio seriam protetoras contra a doença humana. Em ensaios pré-clínicos no modelo macaco rhesus de LC/L. major (Infect Immun 2001, 69:4103), confirmamos a excelente proteção imune induzida pela vacinação com as proteínas recombinantes TSA/LmSTI1 na mistura adjuvante IL-12/Alum. Há estudos (Curr Opin Immunol 2000, 12:442) indicando claramente que a imunidade adquirida contra patógenos intracelulares é duradoura em indivíduos vacinados com plasmídeos vetores de imunógenos protetores. Vacinas DNAs expressando diretamente imunógenos de Leishmania no organismo são mais eficazes (do que as proteínas recombinantes) em camundongos (J Exp Med 1997, 186: 1137; J Immunol 2001, 166: 5122) e cães (Vaccine 2003, 21: 2474) contra LC ou LV. Neste estudo piloto conduzido no modelo macaco rhesus de LC/L. major, pretendemos estudar de maneira comparativa (entre os grupos de animais vacinados e controles) a magnitude dos efeitos protetores induzidos com a vacinação usando as estratégias prime/boost homóloga [DNA/DNA] e heteróloga [DNA/MVA (modified Vaccinia Ankara virus), no caso com ambos os vetores expressando o imunógeno protetor TryP [tryparedoxin peroxidase] (Mol Biochem Parasitol 1998, 96:125). Os experimentos foram delineados para determinar nos animais vacinados os mecanismos efetores da imunidade protetora mediada por células T específicas (em particular, através da via de diferenciação Th1). Palavras-chave: 1: imunização 2: Leishmania major 3: modelo experimental rhesus Apoio financeiro: 1: CAPES 2: Fiocruz 3: PRONEX 3/CNPq, Bill & Melina Gates Foundation (USA)
Está inserido no PAPES 3? Não
Está inserido no PDTIS? Não
Está inserido no PDTSP? Não
Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento do CNPq: Grande Área: Ciências Biológicas 2.00.00.00-6 Área: Imunologia 2.11.00.00-4 Sub-Área: Imunologia Aplicada 2.11.04.00-0 Especialidade: Caracterização do Perfil Isotípico das Imunoglobulinas de Indivíduos Chagásicos Frente aos Antígenos Recombinantes CRA e FRA de Trypanosoma cruzi. Aluno: Alinne Fernanda Amaral Verçosa Nome em cit. bibliográficas: VERÇOSA, Alinne F. A. Vínculo Institucional: Mestrado Tipo de Bolsa: CAPES E-mail: alinne@cpqam.fiocruz.br Curso: CPqAM - Mestrado em Saúde Pública Ano de Ingresso: 2004 Orientador(a): Yara de Miranda Gomes Nome em cit. bibliográficas: GOMES, Yara M. Segundo(a) orientador(a): Wayner Vieira de Souza Nome em cit. bibliográficas: SOUZA, Wayner V. Pesquisador(a) Colaborador(a): Nome em citações bibliográficas: Área de Concentração: Controle de Endemias e Métodos de Diagnóstico Evento: IX Jornada Científica da Pós-Graduação
Resumo:
A identificação de um marcador de evolução de prognóstico das formas clínicas da doença de Chagas poderia contribuir para o redirecionamento da conduta terapêutica do paciente chagásico. Desta forma seria importante analisar o perfil isotípico das imunoglobulinas de pacientes chagásicos crônicos frente aos antígenos recombinantes (Ags-Recs) CRA (cytoplasmic repetitive antigen) e FRA (flagellar repetitive antigen) de T. cruzi, correlacionando-o com as formas clínicas indeterminada (FI), cardíaca (FC) e digestiva (FD) da doença de Chagas. Os Ags-Recs foram analisados por eletroforese e coloração pela prata para verificação da pureza. As amostras de antígenos estavam livres de contaminação protéica e não se apresentaram degradadas. Dezesseis pacientes chagásicos foram selecionados do Ambulatório de Doença de Chagas do Hospital das Clínicas da Universidade Federal de Pernambuco e do Hospital Universitário Oswaldo Cruz da Universidade de Pernambuco após exame clínico-laboratorial padronizado, sendo 12 tratados (FC=8, FI=3 e FD=1) e 4 não-tratados na FC. Também selecionamos 20 indivíduos saudáveis. A concentração ótima de Ag-Rec CRA foi verificada através de ELISA indireto. As placas foram sensibilizadas com 100 µL do Ag-Rec CRA nas concentrações de 5,0, 2,5, 1,25 e 0,625 µg/mL, sendo esta última a concentração ideal da proteína (pä@äBä[ä`äwä|äääÞäáäíäåå7å@åEåSå«å³å¸åÉåËåÑåîåïáïáïáïáïáïáïáïáïáïáïáïáïáïáÑáÑáÑáÑáÑáÑáÑáÑáïáïáïáïáïáïáïáïáïáïáïáïáïáïáïáïáÑáÑáïá hÊ|ý0JCJOJQJ^JaJhÊ|ýCJOJQJ^JaJ hÊ|ý5CJOJQJ\^JaJR ÒÕÕBä`ä|äääçìçûðñ5ñQñýôõû2ûNûjû-üüþþÇÈûüµ ýû÷ûûûýû÷ûûûýû÷ûûû÷ûûûûýûýûû¤ð îå
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