TP n°8 - La double origine des cancers
Partie 2 : Un phénomène inquiétant : l'acquisition de résistance. Proposez une
explication à l'origine de la résistance des bactéries aux antibiotiques et ...
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Lutilisation raisonnée des antibiotiques,
un enjeu majeur de santé publique
Objectif de connaissance : On cherche à savoir quelle est lorigine des résistances aux antibiotiques des bactéries.
Objectifs méthodologiques : Réaliser une manipulation daprès un protocole. Adopter une démarche explicative.
Travail à réaliser :
Partie 1 : Les bactéries sont naturellement résistantes aux antibiotiques .Réalisez un antibiogramme en vous aidant du protocole décrit dans le document 1. Déterminez les résistances naturelles (sensible, intermédiaire et résistante) de chaque bactérie aux antibiotiques utilisés.
Partie 2 : Un phénomène inquiétant : lacquisition de résistance. Proposez une explication à lorigine de la résistance des bactéries aux antibiotiques et expliquez pourquoi les bactéries résistantes sont de plus en plus nombreuses.
« En juin 2011, la bactérie Escherichia coli (
) a fait 76 morts en Europe. Elle avait comme particularité, outre sa virulence, dêtre très résistante aux antibiotiques. Le phénomène touche dautres colibacilles, des bactéries très communes qui peuplent par millions les tubes digestifs des hommes et des animaux. Certaines ont aujourdhui la capacité de résister à quasiment tout larsenal thérapeutique, laissant les médecins désarmés. » Le Monde, Le boom des bactéries résistantes aux antibiotiques, 30/08/2011.
Quelles sont les origines de la résistance aux antibiotiques ?
ActivitésCapacitésActivité 1 : Les bactéries sont naturellement résistantes aux antibiotiques
Réaliser un antibiogramme
Réalisez la manipulation proposée en saidant du protocole décrit dans le document 1.
Utilisez vos résultats et le document 2 afin de déterminer les résistances naturelles (sensible, intermédiaire et résistant) de chaque bactérie aux antibiotiques utilisés. Récapitulez vos observations dans un tableau à double entrée.
Résumez vos observations dans un court texte et complétez vos données grâce au document 3 présentant les différents modes daction des antibiotiques.
Activité 2 : Un phénomène inquiétant : lacquisition de résistance et les multi-résistances
Analysez le document 4 et comparez les séquences dADN et dacides aminés proposées et expliquer lorigine de la résistance des bactéries aux antibiotiques.
A laide la vidéo résistance-bactérienne
HYPERLINK "http://www.evolution-of-life.com/fr/observer/video/fiche/mutations-selection-the-bacteria-resist.html" http://www.evolution-of-life.com/fr/observer/video/fiche/mutations-selection-the-bacteria-resist.html
HYPERLINK "http://www.youtube.com/watch?v=26xiGxTAubI&feature=player_embedded" \l "!" http://www.youtube.com/watch?v=26xiGxTAubI&feature=player_embedded#!,
expliquez pourquoi les bactéries résistantes sont de plus en plus nombreuses.
Rangez le matériel.
Conclusion : Réaliser un schéma bilan résumant les causes de la résistance des bactéries aux antibiotiques et les moyens de la combattre.
Réaliser une manipulation en suivant un protocole expérimental (Travailler proprement et TRES CALMEMENT
Construire un tableau à double entrée Extraire des informations
Rédiger un texte scientifique (Utiliser le vocabulaire scientifique)
identifier les mesures de prévention possibles
être conscient de sa responsabilité en matière de santé
Document 1 : Protocole expérimental Réalisation dun antibiogramme
Un antibiogramme est une expérience de mise en culture de bactérie permettant de mettre en évidence et de quantifier l'action d'antibiotiques. Vous allez réalisez un antibiogramme sur une souche d'Escherichia coli testant les quatre substances suivantes : Céfotaxime (C), Pénicilline (P), Tétracycline (TE), Polymyxines (PM).
Matériel à disposition:
- une boite de pétri gélosée contenant un milieu nutritif gélosé ainsi que la bactérie Escherichia coli
- une micropipette avec 4 pointes,
- une pince pour déposer les pastilles antibiotiques,
- 4 tubes contenant chacun un antibiotique: Céfotaxime (C), Pénicilline (P), Tétracycline (TE) et Polymyxines (PM).
Protocole de réalisation lantibiogramme
- Vous disposez de tubes à essais portant le nom de différents antibiotiques.
- Avec une micropipette, placer une goutte dun des 4 antibiotiques, sur une pastille de papier filtre.
- Avec une pince, déposer la pastille sur la gélose. Renouveler lopération avec les 3 autres antibiotiques.
Espacer au maximum les disques les uns des autres et du bord.
Attention :
A changer la pointe de la micropipette entre chaque utilisation dantibiotiques
A rincer la pince entre chaque utilisation.
La pastille ne doit pas goutter sur la gélose.
- Marquer les endroits où sont posés les antibiotiques et marquer la boîte de votre nom.
Mise en culture pendant 15min puis observer les boîtes
Document 2 : Aide à la lecture des résultats
Lutilisation raisonnée des antibiotiques,
un enjeu majeur de santé publique
FICHE LABO
Site consulté pour mettre en place cette séance :
HYPERLINK "http://www.svt.ac-versailles.fr/spip.php?article674" http://www.svt.ac-versailles.fr/spip.php?article674
PRINCIPE :
Partie de lantibiogrammeMatériel utilisé en réalité au laboratoirebactériesRéactif coloré sensible au pHAntibiotique efficace contre la bactérieHClAntibiotique inefficace contre la bactérieEau distillée
MATERIEL :
Boîtes de Pétri (le nombre dépend de la construction de la séance)
Acide chlorhydrique
Marqueur
250 mL de Gélose (agar)
Tubes à essai
Pinces fines
Portoirs
Pastilles de papier filtre (préparées par exemple avec un perforateur de bureau sur du papier filtre plié pour avoir plus dépaisseur)
5 à 10 gouttes de phénolphtaléine + 1 mL de soude (1mole)
Préparation des boîtes de gélose (agar)
Préparer la gélose (agar) selon les instructions du fabricant. 250 mL pour 16 groupes environ.
Lorsquil est légèrement refroidi, mais pas encore solidifié, verser dans une boîte (pour pouvoir montrer aux élèves la couleur indiquant labsence de croissance bactérienne).
Ajouter ensuite suffisamment de phénolphtaléine (5 à 10 gouttes) pour que lagar prenne une couleur rose soutenue (représentant la croissance bactérienne) et bien mélanger.
Verser dans chaque boîte de Pétri et laisser refroidir. Ne pas couler les milieux trop fins, ni trop épais (1.5 mm), afin que la taille des décolorations sadapte à celle de la boîte.
détail des « antibiotiques » utilisés.
AntibiotiquesProduit à mettre sur la pastilleTétracycline TEHCl à 0.5 molePolymyxine PMHCl à 1 moleCefotaxime CEau distilléePenicilline PEau distillée Manipulation élèves : Les élèves disposent de tubes à essais portant le nom de différents antibiotiques et contenant en réalité de lacide chlorhydrique (5%) ou de leau. Avec la pince fine, une pastille de papier filtre est trempée dans un des tubes à essai puis déposé sur la gélose en suivant le schéma ci-dessous :
Le protocole initial du site e-bug propose de trouer la gélose à lemporte pièce et de déposer lantibiotique/HCl avec une pipette compte-gouttes (un peu comme dans le protocole dOuchterlony). Nous proposons de déposer une pastille de papier filtre imbibée dHCl pour que le geste se rapproche davantage de la réalisation dun véritable antibiogramme.
APERCU DU RESULTAT DE LANTIBIOGRAMME SUR LA BOITE DE PETRI
Schéma modifié à partir du site :
HYPERLINK "http://svt.ac-dijon.fr/schemassvt/article.php3?id_article=2886" http://svt.ac-dijon.fr/schemassvt/article.php3?id_article=2886
Boîte de pétri
PM
Tapis bactérien développé sur gélose nutritive
La souche bactérienne est résistante à lantibiotique
C
P
La souche bactérienne est partiellement sensible à lantibiotique
TE
Auréole de lyse indiquant que la souche bactérienne est sensible à lantibiotique